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SW620-Luc
Tecido
Metastático
Doença
Adenocarcinoma do cólon
Local da metástase
Nódulo linfático
Sinónimos
SW620, SW 620, SW.620

Documentos

SW620-Luc

Cell line · Número do produto 305704

A SW620-Luc é um derivado bioluminescente da linha celular humana SW620 de adenocarcinoma de cólon metastático, modificada geneticamente para expressar de forma estável uma luciferase de pirilampo...

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01Informações gerais

Descrição

A SW620-Luc é um derivado bioluminescente da linha celular humana SW620 de adenocarcinoma de cólon metastático, modificada geneticamente para expressar de forma estável um gene repórter de luciferase de pirilampo. A linha celular parental SW620 foi derivada de uma metástase num gânglio linfático do mesmo doente a partir do qual a linha SW480 foi estabelecida, permitindo estudos comparativos emparelhados entre o tumor primário e a metástase sobre a biologia do cancro colorretal. As células SW620 apresentam uma morfologia de tipo epitelial e partilham as mesmas mutações oncogénicas chave que a SW480, incluindo KRAS G12V, TP53 R273H e P309S, e truncamento de APC, mas exibem mais características mesenquimais e um maior potencial invasivo, em consonância com a sua origem metastática. A SW620 é amplamente utilizada para estudar a metástase do cancro colorretal, a transição epitelial-mesenquimal (EMT) e os mecanismos de resistência terapêutica.

A integração estável de luciferase na SW620-Luc permite a imagem por bioluminescência (BLI) sensível e quantitativa da carga tumoral em modelos de xenoenxertos e de metástase experimental em hospedeiros imunocomprometidos. O sinal emitido correlaciona-se com o número de células tumorais viáveis, permitindo a monitorização longitudinal do enxerto tumoral, da cinética de crescimento, da colonização hepática e da disseminação nos gânglios linfáticos. O SW620-Luc é particularmente valioso para estudar a progressão metastática do cancro colorretal, avaliar agentes antimetastáticos e realizar estudos comparativos in vivo com a linha primária SW480 correspondente.

A SW620-Luc mantém o perfil molecular e o fenótipo metastático da linha parental SW620, incluindo mutações KRAS e TP53. A modificação com luciferase melhora substancialmente o rendimento experimental e a sensibilidade para a avaliação farmacodinâmica in vivo da eficácia do tratamento. Os investigadores devem verificar a atividade da luciferase, o perfil mutacional e a cinética de crescimento nas suas condições experimentais específicas antes da utilização pré-clínica em grande escala.

Tecido
Metastático
Doença
Adenocarcinoma do cólon
Local da metástase
Nódulo linfático
Sinónimos
  • SW620
  • SW 620
  • SW.620

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus atímicos

04Identificadores

Referência
SW620-Luc (número de catálogo da Cytion 305704)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_J268

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
Luc2 (firefly, com codões otimizados)
Perfil mutacional
Mutação: p.Gln1338Ter, Homozigótico; Mutação: p.Gly12Val, Homozigótico; Mutação: p.Arg273His, Heterozigótico; Mutação: p.Pro309Ser, Heterozigótico

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 3
Densidade de sementeira
1 a 3 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controlo de qualidade e criopreservação

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo + 10% de DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
51 anos
Etnia
Caucasiano