Mine otse sisu juurde
SW620-Luc
Kude
Metastaatiline
Haigus
Jämesoole adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
SW620, SW 620, SW.620

Dokumendid

SW620-Luc

Cell line · Toote number 305704

SW620-Luc on inimese SW620 metastaatilise käärsoole adenokartsinoomi rakuliini bioluminestsentne derivaat, mis on geneetiliselt muundatud nii, et see ekspresseeriks stabiilselt tulikärbse lusiferaasi r...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

SW620-Luc on inimese metastaatilise käärsoole adenokartsinoomi rakuliini SW620 bioluminestsentne derivaat, mis on geneetiliselt muundatud väljendama stabiilselt särava tulikärbse lusiferase reportergeeni. Algrakuliin SW620 on saadud sama patsiendi lümfisõlme metastaasist, kellelt loodi ka SW480, mis võimaldab teha kolorektaalvähi bioloogia võrdlevaid uuringuid primaar- ja metastaatiliste rakkude vahel. SW620 rakud näitavad epiteelilaadset morfoloogiat ja neil on samad peamised onkogeensed mutatsioonid kui SW480-l, sealhulgas KRAS G12V, TP53 R273H ja P309S ning APC trunkaatsioon, kuid neil on rohkem mesenküümseid tunnuseid ja suurem invasiivne potentsiaal, mis on kooskõlas nende metastaatilise päritoluga. SW620-t kasutatakse laialdaselt kolorektaalse vähi metastaaside, epiteelist mesenküümseks ülemineku (EMT) ja ravimresistentsuse mehhanismide uurimiseks.

Stabiilne lusiferase integratsioon SW620-Luc-is võimaldab tundlikku, kvantitatiivset bioluminestsentskuvamist (BLI) kasvajakoormuse hindamiseks ksenotransplantaadi ja eksperimentaalsetes metastaasimudelites immuunpuudulikkusega peremeestel. Emiteeritud signaal korrelatsioonis elujõuliste kasvajarakkude arvuga, toetades kasvaja juurdumise, kasvukineetika, maksa koloniseerumise ja lümfisõlmede leviku pikaajalist jälgimist. SW620-Luc on eriti väärtuslik kolorektaalse vähi metastaatilise progressiooni uurimiseks, metastaasivastaste ravimite hindamiseks ja võrdlevate in vivo uuringute läbiviimiseks sobiva primaarse SW480 liiniga.

SW620-Luc säilitab emaliini SW620 molekulaarprofiili ja metastaatilise fenotüübi, sealhulgas KRAS- ja TP53-mutatsioonid. Lusiferase modifikatsioon suurendab oluliselt eksperimendi läbilaskevõimet ja tundlikkust ravi efektiivsuse in vivo farmakodünaamiliseks hindamiseks. Enne laiaulatuslikku prekliinilist kasutamist peaksid teadlased oma konkreetsetes katsetingimustes kontrollima lusiferase aktiivsust, mutatsiooniprofiili ja kasvukineetikat.

Kude
Metastaatiline
Haigus
Jämesoole adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
  • SW620
  • SW 620
  • SW.620

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, atüümsetel alasti hiirtel

04Tunnused

Viide
SW620-Luc (Cytioni katalooginumber 305704)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_J268

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
Luc2 (tulikärbes, kodonoptimeeritud)
Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: p.Gln1338Ter, homosügootne; Mutatsioon: p.Gly12Val, homosügootne; Mutatsioon: p.Arg273His, heterosügootne; Mutatsioon: p.Pro309Ser, heterosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
1 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
51 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia