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BHT101
Gewebe
Schilddrüse
Krankheit
Anaplastisches Schilddrüsenkarzinom
Metastasenherd
Lymphknoten
Synonyme
BHT-101

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BHT101

Cell line · Artikelnummer 305112

The BHT101 cell line is derived from the lymph node metastasis of a 63-year-old woman diagnosed with anaplastic papillary thyroid carcinoma. This cell lin...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie BHT101 stammt aus der Lymphknotenmetastase einer 63-jährigen Frau, bei der ein anaplastisches papilläres Schilddrüsenkarzinom diagnostiziert wurde. Diese Zelllinie wurde aus einer sehr aggressiven und tödlichen Form von Schilddrüsenkrebs entwickelt, die für ihr schnelles Fortschreiten und ihre schlechte Prognose bekannt ist. BHT101-Zellen zeichnen sich durch eine fehlende Hormonproduktion aus, was typisch für Zellen aus anaplastischen Schilddrüsenkarzinomen ist, da diese Zellen häufig die Fähigkeit verlieren, Schilddrüsenhormone zu synthetisieren, die für differenzierteres Schilddrüsengewebe charakteristisch sind.

Was die Expression von Biomarkern betrifft, so sind BHT101-Zellen teilweise positiv für Thyreoglobulin und Thyroxin (T4). Thyreoglobulin ist ein Vorläufer-Glykoprotein, das für die Produktion der Schilddrüsenhormone T3 und T4 entscheidend ist und üblicherweise als Tumormarker bei der Differenzierung von Schilddrüsenkrebsarten verwendet wird. Das Vorhandensein von Thyreoglobulin in BHT101-Zellen, wenn auch nur teilweise, ist für die Forschung im Bereich der Pathologie von Schilddrüsenkrebs und der molekularen Mechanismen, die der Dedifferenzierung von Schilddrüsenkarzinomen zugrunde liegen, von Bedeutung. Das einzigartige Profil dieser Zelllinie macht sie zu einem wertvollen Modell für die Untersuchung des Fortschreitens und des metastatischen Verhaltens des anaplastischen Schilddrüsenkarzinoms und bietet Einblicke in die molekularen Veränderungen, die diese Prozesse antreiben.

Gewebe
Schilddrüse
Krankheit
Anaplastisches Schilddrüsenkarzinom
Metastasenherd
Lymphknoten
Synonyme
  • BHT-101

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
BHT101 (Cytion Katalognummer 305112)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1085

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 20% hitzeinaktiviertem FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
63 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch