Pāriet uz saturu
BHT101
Audums
Vairogdziedzera
Slimība
Anaplastiskā vairogdziedzera karcinoma
Metastāžu vieta
Limfmezgls
Sinonīmi
BHT-101

Dokumenti

BHT101

Cell line · Preces numurs 305112

The BHT101 cell line is derived from the lymph node metastasis of a 63-year-old woman diagnosed with anaplastic papillary thyroid carcinoma. This cell lin...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

BHT101 šūnu līnija ir iegūta no limfmezglu metastāzēm 63 gadus vecai sievietei, kurai diagnosticēta anaplastiska papilārā vairogdziedzera karcinoma. Šī šūnu līnija ir izveidota no ļoti agresīvas un letālas vairogdziedzera vēža formas, kas pazīstama ar strauju progresēšanu un sliktu prognozi. BHT101 šūnas izceļas ar to, ka tās neražo hormonus, kas ir raksturīgi šūnām, kuras radušās no anaplastiskās vairogdziedzera karcinomas, jo šīs šūnas bieži zaudē spēju sintezēt vairogdziedzera hormonus, kas ir raksturīgi vairāk diferencētiem vairogdziedzera audiem.

Attiecībā uz biomarķieru ekspresiju BHT101 šūnas ir daļēji pozitīvas attiecībā uz tiroglobulīnu un tiroksīnu (T4). Tiroglobulīns ir vairogdziedzera hormonu T3 un T4 ražošanai būtisks glikoproteīna prekursors, un to parasti izmanto kā audzēja marķieri vairogdziedzera vēža veidu diferencēšanai. Tiroglobulīna klātbūtne BHT101 šūnās, pat ja tā ir tikai daļēja, ir nozīmīga pētījumiem, kas vērsti uz vairogdziedzera vēža patoloģiju un molekulārajiem mehānismiem, kas nosaka vairogdziedzera karcinomu dediferenciāciju. Šīs šūnu līnijas unikālais profils padara to par vērtīgu modeli anaplastiskās vairogdziedzera karcinomas progresēšanas un metastātiskas uzvedības izpētei, sniedzot ieskatu par molekulārajām izmaiņām, kas nosaka šos procesus.

Audums
Vairogdziedzera
Slimība
Anaplastiskā vairogdziedzera karcinoma
Metastāžu vieta
Limfmezgls
Sinonīmi
  • BHT-101

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
BHT101 (Cytion kataloga numurs 305112)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1085

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 20 % termiski inaktivētu FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
63 gadi
Etniskā piederība
Eiropas