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HPAF-II
Gewebe
Bauchspeicheldrüse
Krankheit
Duktales Adenokarzinom der Bauchspeicheldrüse
Metastasenherd
Aszites
Synonyme
HPAF II, HPAFII, HPAF-2, HPAF2, HPAF/CD18, CD18/HPAF, HPAF-II/CD18, CD-18, CD18, CD 18

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HPAF-II

Cell line · Artikelnummer 305088

HPAF-II is a human pancreatic adenocarcinoma cell line derived from an adult patient. This cell line is commonly used in cancer research due to its releva...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

HPAF-II ist eine humane Adenokarzinom-Zelllinie der Bauchspeicheldrüse, die von einem erwachsenen Patienten stammt. Diese Zelllinie wird in der Krebsforschung häufig verwendet, da sie für die Untersuchung von Bauchspeicheldrüsenkrebs, einer hochaggressiven und tödlichen bösartigen Erkrankung, von Bedeutung ist. HPAF-II-Zellen weisen eine epitheliale Morphologie auf und sind dafür bekannt, dass sie Tumore bilden, wenn sie in immungeschwächte Mäuse xenotransplantiert werden, was sie zu einem wertvollen Modell für In-vivo-Untersuchungen des Tumorwachstums, der Metastasierung und des Ansprechens auf therapeutische Eingriffe macht. Forscher setzen HPAF-II-Zellen häufig ein, um die molekularen Mechanismen zu untersuchen, die dem Fortschreiten des Bauchspeicheldrüsenkrebses zugrunde liegen, darunter genetische und epigenetische Veränderungen, Signaltransduktionswege und Interaktionen mit der Mikroumgebung des Tumors.

HPAF-II-Zellen zeichnen sich durch spezifische genetische Mutationen und Veränderungen aus, die häufig bei Adenokarzinomen der Bauchspeicheldrüse zu beobachten sind. Dazu gehören Mutationen im KRAS-Gen, das eine entscheidende Rolle bei der Zellsignalisierung und -proliferation spielt, sowie Veränderungen in Tumorsuppressorgenen wie TP53 und CDKN2A. Die Zelllinie weist auch eine hohe Muzinproduktion auf, eine Eigenschaft, die zur Aggressivität von Pankreastumoren beiträgt. Studien mit HPAF-II-Zellen haben wichtige Einblicke in die Biologie des Bauchspeicheldrüsenkrebses ermöglicht und die Entwicklung potenzieller therapeutischer Strategien erleichtert, die auf wichtige molekulare Wege abzielen, die an der Krankheit beteiligt sind.

Gewebe
Bauchspeicheldrüse
Krankheit
Duktales Adenokarzinom der Bauchspeicheldrüse
Metastasenherd
Aszites
Synonyme
  • HPAF II
  • HPAFII
  • HPAF-2
  • HPAF2
  • HPAF/CD18
  • CD18/HPAF
  • HPAF-II/CD18
  • CD-18
  • CD18
  • CD 18

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial
Verdopplungszeit
26 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
HPAF-II (Cytion-Katalognummer 305088)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0313

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
44 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch