Přejít na obsah
HPAF-II
Tkáň
Pankreas
Nemoc
Duktální adenokarcinom pankreatu
Místo metastázy
Ascites
Synonyma
HPAF II, HPAFII, HPAF-2, HPAF2, HPAF/CD18, CD18/HPAF, HPAF-II/CD18, CD-18, CD18, CD 18

Dokumenty

HPAF-II

Cell line · Číslo výrobku 305088

HPAF-II is a human pancreatic adenocarcinoma cell line derived from an adult patient. This cell line is commonly used in cancer research due to its releva...

€650.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

HPAF-II je buněčná linie lidského adenokarcinomu pankreatu odvozená od dospělého pacienta. Tato buněčná linie se běžně používá v onkologickém výzkumu vzhledem k jejímu významu pro studium rakoviny slinivky břišní, vysoce agresivního a smrtelného zhoubného onemocnění. Buňky HPAF-II vykazují epiteliální morfologii a jsou známé svou schopností vytvářet nádory při xenotransplantaci do imunokompromitovaných myší, což z nich činí cenný model pro in vivo studie růstu nádorů, metastazování a reakce na terapeutické zásahy. Výzkumníci často využívají buňky HPAF-II ke zkoumání molekulárních mechanismů, které jsou základem progrese karcinomu pankreatu, včetně genetických a epigenetických změn, signálních transdukčních drah a interakcí s nádorovým mikroprostředím.

Buňky HPAF-II se vyznačují specifickými genetickými mutacemi a změnami, které jsou často pozorovány u adenokarcinomů pankreatu. Patří mezi ně mutace v genu KRAS, který hraje klíčovou roli v buněčné signalizaci a proliferaci, a změny v nádorových supresorových genech, jako jsou TP53 a CDKN2A. Buněčná linie také vykazuje vysokou produkci mucinu, což je vlastnost, která přispívá k agresivní povaze nádorů slinivky břišní. Studie využívající buňky HPAF-II poskytly významné poznatky o biologii rakoviny slinivky břišní a usnadnily vývoj potenciálních terapeutických strategií zaměřených na klíčové molekulární dráhy, které se podílejí na vzniku tohoto onemocnění.

Tkáň
Pankreas
Nemoc
Duktální adenokarcinom pankreatu
Místo metastázy
Ascites
Synonyma
  • HPAF II
  • HPAFII
  • HPAF-2
  • HPAF2
  • HPAF/CD18
  • CD18/HPAF
  • HPAF-II/CD18
  • CD-18
  • CD18
  • CD 18

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové
Doba zdvojnásobení
26 hodin

04Identifikátory

Citace
HPAF-II (katalogové číslo Cytion 305088)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0313

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
44 let
Etnická příslušnost
Evropská