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HPAF-II
Tessuto
Pancreas
Malattia
Adenocarcinoma duttale del pancreas
Sito metastatico
Ascite
Sinonimi
HPAF II, HPAFII, HPAF-2, HPAF2, HPAF/CD18, CD18/HPAF, HPAF-II/CD18, CD-18, CD18, CD 18

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HPAF-II

Cell line · Codice prodotto 305088

HPAF-II is a human pancreatic adenocarcinoma cell line derived from an adult patient. This cell line is commonly used in cancer research due to its releva...

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01Informazioni generali

Descrizione

HPAF-II è una linea cellulare di adenocarcinoma pancreatico umano derivata da un paziente adulto. Questa linea cellulare è comunemente utilizzata nella ricerca sul cancro per la sua importanza nello studio del tumore del pancreas, una neoplasia altamente aggressiva e letale. Le cellule HPAF-II presentano una morfologia epiteliale e sono note per la loro capacità di formare tumori quando vengono xenotrapiantate in topi immunocompromessi, il che le rende un modello prezioso per gli studi in vivo della crescita tumorale, delle metastasi e della risposta agli interventi terapeutici. I ricercatori utilizzano spesso le cellule HPAF-II per studiare i meccanismi molecolari alla base della progressione del tumore del pancreas, comprese le alterazioni genetiche ed epigenetiche, le vie di trasduzione del segnale e le interazioni con il microambiente tumorale.

Le cellule HPAF-II sono caratterizzate da specifiche mutazioni e alterazioni genetiche che si osservano frequentemente negli adenocarcinomi pancreatici. Queste includono mutazioni nel gene KRAS, che svolge un ruolo critico nella segnalazione e nella proliferazione cellulare, e alterazioni in geni soppressori del tumore come TP53 e CDKN2A. Questa linea cellulare presenta anche alti livelli di produzione di mucina, una caratteristica che contribuisce alla natura aggressiva dei tumori pancreatici. Gli studi condotti con le cellule HPAF-II hanno fornito importanti indicazioni sulla biologia del tumore del pancreas e hanno facilitato lo sviluppo di potenziali strategie terapeutiche mirate a colpire le vie molecolari chiave coinvolte nella malattia.

Tessuto
Pancreas
Malattia
Adenocarcinoma duttale del pancreas
Sito metastatico
Ascite
Sinonimi
  • HPAF II
  • HPAFII
  • HPAF-2
  • HPAF2
  • HPAF/CD18
  • CD18/HPAF
  • HPAF-II/CD18
  • CD-18
  • CD18
  • CD 18

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tempo di raddoppio
26 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HPAF-II (numero di catalogo Cytion 305088)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0313

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
44 anni
Etnia
Europeo