Mine otse sisu juurde
HPAF-II
Kude
Pankreas
Haigus
Pankrease kaksteistsõrmiksoole adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Astsiit
Sünonüümid
HPAF II, HPAFII, HPAF-2, HPAF2, HPAF/CD18, CD18/HPAF, HPAF-II/CD18, CD-18, CD18, CD 18

Dokumendid

HPAF-II

Cell line · Toote number 305088

HPAF-II is a human pancreatic adenocarcinoma cell line derived from an adult patient. This cell line is commonly used in cancer research due to its releva...

€650.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HPAF-II on inimese pankrease adenokartsinoomi rakuliin, mis on saadud täiskasvanud patsiendilt. Seda rakuliini kasutatakse tavaliselt vähiuuringutes, kuna see on oluline kõhunäärmevähi, väga agressiivse ja surmava pahaloomulise haiguse uurimisel. HPAF-II rakkudel on epiteliaalne morfoloogia ja nad on tuntud oma võime poolest moodustada kasvajaid, kui nad on ksenotransplanteeritud immuunpuudulikesse hiirtesse, mis teeb neist väärtusliku mudeli in vivo uuringute jaoks, kus uuritakse kasvaja kasvu, metastaaside teket ja ravivastust terapeutilistele sekkumistele. Teadlased kasutavad HPAF-II rakke sageli kõhunäärmevähi progresseerumise aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide, sealhulgas geneetiliste ja epigeneetiliste muutuste, signaaliülekande radade ja kasvaja mikrokeskkonnaga suhtlemise uurimiseks.

HPAF-II rakke iseloomustavad spetsiifilised geneetilised mutatsioonid ja muutused, mida sageli täheldatakse kõhunäärme adenokartsinoomides. Nende hulka kuuluvad mutatsioonid KRAS-geenis, mis mängib kriitilist rolli raku signaalimisel ja proliferatsioonis, ning muutused kasvajasupressorgeenides, nagu TP53 ja CDKN2A. Rakuliinil on ka suur mukiini tootmine, mis on kõhunäärmekasvaja agressiivse iseloomu põhjuseks. HPAF-II rakke kasutavad uuringud on andnud olulise ülevaate kõhunäärmevähi bioloogiast ja aidanud kaasa võimalike ravistrateegiate väljatöötamisele, mis on suunatud haiguse peamistele molekulaarsetele radadele.

Kude
Pankreas
Haigus
Pankrease kaksteistsõrmiksoole adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Astsiit
Sünonüümid
  • HPAF II
  • HPAFII
  • HPAF-2
  • HPAF2
  • HPAF/CD18
  • CD18/HPAF
  • HPAF-II/CD18
  • CD-18
  • CD18
  • CD 18

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Kahekordistumisaeg
26 tundi

04Tunnused

Viide
HPAF-II (Cytion katalooginumber 305088)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0313

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
44 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa