Pāriet uz saturu
HPAF-II
Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Aizkuņģa dziedzera duktālā adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Ascīts
Sinonīmi
HPAF II, HPAFII, HPAF-2, HPAF2, HPAF/CD18, CD18/HPAF, HPAF-II/CD18, CD-18, CD18, CD 18

Dokumenti

HPAF-II

Cell line · Preces numurs 305088

HPAF-II is a human pancreatic adenocarcinoma cell line derived from an adult patient. This cell line is commonly used in cancer research due to its releva...

€650.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HPAF-II ir cilvēka aizkuņģa dziedzera adenokarcinomas šūnu līnija, kas iegūta no pieauguša pacienta. Šo šūnu līniju parasti izmanto vēža pētījumos, jo tā ir nozīmīga, pētot aizkuņģa dziedzera vēzi, kas ir ļoti agresīvs un nāvējošs ļaundabīgs audzējs. HPAF-II šūnām piemīt epitēlija morfoloģija, un tās ir pazīstamas ar spēju veidot audzējus, kad tās ksenogrāfē imūnkompromitētām pelēm, padarot tās par vērtīgu modeli in vivo audzēju augšanas, metastāžu un reakcijas uz terapeitiskām intervencēm pētījumiem. Pētnieki bieži izmanto HPAF-II šūnas, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas ir aizkuņģa dziedzera vēža progresēšanas pamatā, tostarp ģenētiskās un epiģenētiskās izmaiņas, signālu pārraides ceļus un mijiedarbību ar audzēja mikrovidi.

HPAF-II šūnām ir raksturīgas specifiskas ģenētiskas mutācijas un izmaiņas, kas bieži novērotas aizkuņģa dziedzera adenokarcinomās. Tās ietver mutācijas gēnā KRAS, kam ir būtiska nozīme šūnu signalizācijā un proliferācijā, un izmaiņas tādos audzēja supresoru gēnos kā TP53 un CDKN2A. Šai šūnu līnijai ir arī augsts mucīna ražošanas līmenis, kas veicina aizkuņģa dziedzera audzēju agresivitāti. Pētījumi, kuros izmantotas HPAF-II šūnas, ir snieguši nozīmīgu ieskatu aizkuņģa dziedzera vēža bioloģijā un veicinājuši potenciālo terapeitisko stratēģiju izstrādi, kuru mērķis ir vērsties pret galvenajiem molekulārajiem ceļiem, kas saistīti ar šo slimību.

Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Aizkuņģa dziedzera duktālā adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Ascīts
Sinonīmi
  • HPAF II
  • HPAFII
  • HPAF-2
  • HPAF2
  • HPAF/CD18
  • CD18/HPAF
  • HPAF-II/CD18
  • CD-18
  • CD18
  • CD 18

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
26 stundas

04Identifikatori

Atsauce
HPAF-II (Cytion kataloga numurs 305088)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0313

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
44 gadi
Etniskā piederība
Eiropas