Siirry sisältöön
HPAF-II
Kudos
Haima
Sairaus
Haiman ductuksen adenokarsinooma
Metastaasikohde
Askites
Synonyymit
HPAF II, HPAFII, HPAF-2, HPAF2, HPAF/CD18, CD18/HPAF, HPAF-II/CD18, CD-18, CD18, CD 18

Asiakirjat

HPAF-II

Cell line · Tuotenumero 305088

HPAF-II is a human pancreatic adenocarcinoma cell line derived from an adult patient. This cell line is commonly used in cancer research due to its releva...

€650.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HPAF-II on aikuispotilaasta peräisin oleva ihmisen haiman adenokarsinooma-solulinja. Tätä solulinjaa käytetään yleisesti syöpätutkimuksessa, koska se on tärkeä haimasyövän, erittäin aggressiivisen ja tappavan pahanlaatuisen sairauden, tutkimuksessa. HPAF-II-soluilla on epiteelimorfologia, ja ne ovat tunnettuja kyvystään muodostaa kasvaimia, kun ne siirretään immuunipuutteisiin hiiriin, mikä tekee niistä arvokkaan mallin in vivo -tutkimuksiin, joissa tutkitaan kasvainten kasvua, etäpesäkkeitä ja vastetta terapeuttisiin toimenpiteisiin. Tutkijat käyttävät HPAF-II-soluja usein haimasyövän etenemisen taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseen, mukaan lukien geneettiset ja epigeneettiset muutokset, signaalinvälitysreitit ja vuorovaikutukset kasvaimen mikroympäristön kanssa.

HPAF-II-soluille on ominaista erityiset geneettiset mutaatiot ja muutokset, joita havaitaan usein haiman adenokarsinoomissa. Näitä ovat muun muassa mutaatiot KRAS-geenissä, jolla on kriittinen rooli solujen signaloinnissa ja proliferaatiossa, sekä muutokset kasvainsuppressorigeeneissä, kuten TP53 ja CDKN2A. Solulinjalla on myös runsaasti eritystä, joka vaikuttaa haimakasvainten aggressiivisuuteen. HPAF-II-soluja hyödyntävät tutkimukset ovat antaneet merkittävää tietoa haimasyövän biologiasta ja helpottaneet sellaisten mahdollisten terapeuttisten strategioiden kehittämistä, joilla pyritään vaikuttamaan tautiin liittyviin keskeisiin molekyylireitteihin.

Kudos
Haima
Sairaus
Haiman ductuksen adenokarsinooma
Metastaasikohde
Askites
Synonyymit
  • HPAF II
  • HPAFII
  • HPAF-2
  • HPAF2
  • HPAF/CD18
  • CD18/HPAF
  • HPAF-II/CD18
  • CD-18
  • CD18
  • CD 18

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli
Kaksinkertaistumisaika
26 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
HPAF-II (Cytion-tuotenumero 305088)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0313

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
44 vuotta
Etnisyys
Eurooppalainen