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HPAF-II
Tecido
Pâncreas
Doença
Adenocarcinoma ductal pancreático
Local da metástase
Ascite
Sinónimos
HPAF II, HPAFII, HPAF-2, HPAF2, HPAF/CD18, CD18/HPAF, HPAF-II/CD18, CD-18, CD18, CD 18

Documentos

HPAF-II

Cell line · Número do produto 305088

HPAF-II is a human pancreatic adenocarcinoma cell line derived from an adult patient. This cell line is commonly used in cancer research due to its releva...

€650.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A HPAF-II é uma linha celular de adenocarcinoma pancreático humano derivada de um doente adulto. Esta linha celular é habitualmente utilizada na investigação do cancro devido à sua relevância no estudo do cancro do pâncreas, uma neoplasia maligna altamente agressiva e letal. As células HPAF-II apresentam uma morfologia epitelial e são conhecidas pela sua capacidade de formar tumores quando xenografadas em ratinhos imunocomprometidos, o que as torna um modelo valioso para estudos in vivo do crescimento tumoral, metástases e resposta a intervenções terapêuticas. Os investigadores utilizam frequentemente células HPAF-II para investigar os mecanismos moleculares subjacentes à progressão do cancro pancreático, incluindo alterações genéticas e epigenéticas, vias de transdução de sinais e interações com o microambiente tumoral.

As células HPAF-II são caracterizadas por mutações e alterações genéticas específicas que são frequentemente observadas nos adenocarcinomas pancreáticos. Estas incluem mutações no gene KRAS, que desempenha um papel crítico na sinalização e proliferação celular, e alterações nos genes supressores de tumores, como o TP53 e o CDKN2A. A linha celular também apresenta altos níveis de produção de mucina, uma caraterística que contribui para a natureza agressiva dos tumores pancreáticos. Os estudos que utilizaram células HPAF-II forneceram informações significativas sobre a biologia do cancro do pâncreas e facilitaram o desenvolvimento de potenciais estratégias terapêuticas destinadas a visar as principais vias moleculares envolvidas na doença.

Tecido
Pâncreas
Doença
Adenocarcinoma ductal pancreático
Local da metástase
Ascite
Sinónimos
  • HPAF II
  • HPAFII
  • HPAF-2
  • HPAF2
  • HPAF/CD18
  • CD18/HPAF
  • HPAF-II/CD18
  • CD-18
  • CD18
  • CD 18

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tempo de duplicação
26 horas

04Identificadores

Referência
HPAF-II (número de catálogo da Cytion 305088)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0313

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
44 anos
Etnia
Europeu