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Kelly
Gewebe
Gehirn
Krankheit
Neuroblastom
Synonyme
KELLY, NB19, NB-19, NB19-RIKEN

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Kelly

Cell line · Artikelnummer 300317

The Kelly cell line is a human neuroblastoma cell line derived from a tumor biopsy. Neuroblastoma is a malignant tumor that arises from neural crest cells...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Kelly-Zelllinie ist eine menschliche Neuroblastom-Zelllinie, die aus einer Tumorbiopsie stammt. Das Neuroblastom ist ein bösartiger Tumor, der aus Zellen der Neuralleiste entsteht und in der Regel Kinder und Säuglinge befällt. Kelly-Zellen werden aufgrund ihrer aggressiven Wachstumseigenschaften und ihrer Fähigkeit, sich unter bestimmten Bedingungen in neuronenähnliche Zellen zu differenzieren, in der Forschung intensiv genutzt. Diese Zellen weisen typische Eigenschaften des Neuroblastoms auf, darunter eine hohe MYCN-Amplifikation, die mit einer schlechten Prognose und aggressivem Tumorverhalten einhergeht. Dies macht die Kelly-Zelllinie zu einem wertvollen Modell für die Untersuchung der molekularen Mechanismen des Neuroblastoms und für die Prüfung potenzieller Therapeutika.

Kelly-Zellen haften in der Kultur und können in einem Monolayer wachsen, wodurch sie sich für eine Vielzahl von experimentellen Anwendungen eignen, einschließlich Wirkstoffscreening, Genexpressionsstudien und Untersuchungen zellulärer Signalwege. Sie sind besonders nützlich für die Untersuchung der Auswirkungen der MYCN-gesteuerten Onkogenese und für die Bewertung der Wirksamkeit gezielter Therapien gegen das Neuroblastom. Die Kelly-Zelllinie dient auch als Modell für das Verständnis der Biologie der Neuroblastom-Metastasierung, da diese Zellen die Fähigkeit haben, zu wandern und einzudringen, was das Verhalten des aggressiven Neuroblastoms in vivo widerspiegelt.

Gewebe
Gehirn
Krankheit
Neuroblastom
Synonyme
  • KELLY
  • NB19
  • NB-19
  • NB19-RIKEN

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Tumorauslösend
Ja, an nackten Mäusen.
Verdopplungszeit
30 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
Kelly (Cytion Katalognummer 300317)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_2092

05Expression und Anfälligkeit

Viren
Negativ für HPV (Humanes Papillomavirus)
Produkte
N-myc RnA

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
1 Jahr
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch