Mine otse sisu juurde
Kelly
Kude
Aju
Haigus
Neuroblastoom
Sünonüümid
KELLY, NB19, NB-19, NB19-RIKEN

Dokumendid

Kelly

Cell line · Toote number 300317

The Kelly cell line is a human neuroblastoma cell line derived from a tumor biopsy. Neuroblastoma is a malignant tumor that arises from neural crest cells...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Kelly rakuliin on inimese neuroblastoomi rakuliin, mis on saadud kasvaja biopsiast. Neuroblastoom on pahaloomuline kasvaja, mis tekib närvirakirakkudest ja mõjutab tavaliselt lapsi ja imikuid. Kelly rakke kasutatakse teadusuuringutes laialdaselt nende agressiivsete kasvuomaduste ja võime tõttu diferentseeruda neuronilaadseks rakuks spetsiifilistes tingimustes. Nendel rakkudel on neuroblastoomile iseloomulikud omadused, sealhulgas MYCN-i kõrge amplifikatsioon, mis on seotud halva prognoosi ja agressiivse kasvajakäitumisega. See muudab Kelly rakuliini väärtuslikuks mudeliks neuroblastoomi molekulaarmehhanismide uurimiseks ja võimalike terapeutiliste ainete testimiseks.

Kelly rakud on kultuuris kleepuvad ja võivad kasvada monokihina, mistõttu sobivad nad mitmesuguste eksperimentaalsete rakenduste jaoks, sealhulgas ravimite skriininguks, geeniekspressiooni uuringuteks ja raku signaaliradade uurimiseks. Nad on eriti kasulikud MYCN-juhitud onkogeneesi mõjude uurimiseks ja neuroblastoomi vastu suunatud ravimeetodite tõhususe hindamiseks. Kelly rakuliin on ka mudeliks neuroblastoomi metastaaside bioloogia mõistmiseks, kuna need rakud on võimelised rändama ja tungima, mis peegeldab agressiivse neuroblastoomi käitumist in vivo.

Kude
Aju
Haigus
Neuroblastoom
Sünonüümid
  • KELLY
  • NB19
  • NB-19
  • NB19-RIKEN

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel.
Kahekordistumisaeg
30 tundi

04Tunnused

Viide
Kelly (Cytioni katalooginumber 300317)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_2092

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
Negatiivne HPV (inimese papilloomiviiruse) suhtes
Tooted
N-myc RnA

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
1 aasta
Etniline kuuluvus
Kaukaasia