Przejdź do treści
Kelly
Chusteczka
Mózg
Choroba
Neuroblastoma
Synonimy
KELLY, NB19, NB-19, NB19-RIKEN

Dokumenty

Kelly

Cell line · Numer produktu 300317

The Kelly cell line is a human neuroblastoma cell line derived from a tumor biopsy. Neuroblastoma is a malignant tumor that arises from neural crest cells...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa Kelly to ludzka linia komórkowa neuroblastoma pochodząca z biopsji guza. Neuroblastoma jest nowotworem złośliwym, który powstaje z komórek grzebienia nerwowego i zazwyczaj dotyka dzieci i niemowlęta. Komórki Kelly są szeroko wykorzystywane w badaniach ze względu na ich agresywną charakterystykę wzrostu i zdolność do różnicowania się w komórki podobne do neuronów w określonych warunkach. Komórki te wykazują właściwości typowe dla nerwiaka niedojrzałego, w tym wysoki poziom amplifikacji MYCN, co wiąże się ze złym rokowaniem i agresywnym zachowaniem guza. Sprawia to, że linia komórkowa Kelly jest cennym modelem do badania mechanizmów molekularnych nerwiaka niedojrzałego i testowania potencjalnych środków terapeutycznych.

Komórki Kelly są przylegające w hodowli i mogą rosnąć w monowarstwie, dzięki czemu nadają się do szerokiego zakresu zastosowań eksperymentalnych, w tym do badań przesiewowych leków, badań ekspresji genów i badań komórkowych szlaków sygnałowych. Są one szczególnie przydatne do badania skutków onkogenezy wywołanej przez MYCN oraz do oceny skuteczności terapii celowanych przeciwko nerwiakowi niedojrzałemu. Linia komórkowa Kelly służy również jako model do zrozumienia biologii przerzutów nerwiaka niedojrzałego, ponieważ komórki te mają zdolność do migracji i inwazji, odzwierciedlając zachowanie agresywnego nerwiaka niedojrzałego in vivo.

Chusteczka
Mózg
Choroba
Neuroblastoma
Synonimy
  • KELLY
  • NB19
  • NB-19
  • NB19-RIKEN

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy.
Czas podwojenia
30 godzin

04Identyfikatory

Źródło
Kelly (numer katalogowy Cytion 300317)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2092

05Ekspresja i podatność

Wirusy
Negatywny dla wirusa HPV (wirus brodawczaka ludzkiego)
Produkty
N-myc RnA

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
1 rok
Pochodzenie etniczne
Kaukaski