Siirry sisältöön
Kelly
Kudos
Aivot
Sairaus
Neuroblastooma
Synonyymit
KELLY, NB19, NB-19, NB19-RIKEN

Asiakirjat

Kelly

Cell line · Tuotenumero 300317

The Kelly cell line is a human neuroblastoma cell line derived from a tumor biopsy. Neuroblastoma is a malignant tumor that arises from neural crest cells...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Kelly-solulinja on ihmisen neuroblastooma-solulinja, joka on peräisin kasvainbiopsiasta. Neuroblastooma on pahanlaatuinen kasvain, joka saa alkunsa hermoruston soluista ja vaikuttaa tyypillisesti lapsiin ja pikkulapsiin. Kellyn soluja hyödynnetään laajalti tutkimuksessa niiden aggressiivisten kasvuominaisuuksien ja niiden kyvyn erilaistua neuronin kaltaisiksi soluiksi tietyissä olosuhteissa. Näillä soluilla on neuroblastoomalle tyypillisiä ominaisuuksia, kuten korkea MYCN-monistuminen, joka liittyy huonoon ennusteeseen ja aggressiiviseen kasvainkäyttäytymiseen. Tämä tekee Kellyn solulinjasta arvokkaan mallin neuroblastooman molekyylimekanismien tutkimiseen ja mahdollisten terapeuttisten aineiden testaamiseen.

Kellyn solut ovat tarttuvia viljelyssä ja voivat kasvaa monokerroksessa, joten ne soveltuvat monenlaisiin kokeellisiin sovelluksiin, kuten lääkeseulontaan, geeniekspressiotutkimuksiin ja solujen signaalireittien tutkimiseen. Ne ovat erityisen käyttökelpoisia MYCN-vetoisen onkogeneesin vaikutusten tutkimisessa ja neuroblastoomaan kohdistettujen hoitojen tehokkuuden arvioinnissa. Kelly-solulinja toimii myös mallina neuroblastooman etäpesäkkeiden biologian ymmärtämisessä, sillä näillä soluilla on kyky vaeltaa ja tunkeutua, mikä kuvastaa aggressiivisen neuroblastooman käyttäytymistä in vivo.

Kudos
Aivot
Sairaus
Neuroblastooma
Synonyymit
  • KELLY
  • NB19
  • NB-19
  • NB19-RIKEN

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä.
Kaksinkertaistumisaika
30 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
Kelly (Cytionin luettelonumero 300317)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_2092

05Ilmentyminen ja alttius

Virukset
Negatiivinen HPV:n (ihmisen papilloomavirus) suhteen
Tuotteet
N-myc RnA

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
1 vuosi
Etnisyys
Kaukasialainen