Pāriet uz saturu
Kelly
Audums
Smadzenes
Slimība
Neuroblastoma
Sinonīmi
KELLY, NB19, NB-19, NB19-RIKEN

Dokumenti

Kelly

Cell line · Preces numurs 300317

The Kelly cell line is a human neuroblastoma cell line derived from a tumor biopsy. Neuroblastoma is a malignant tumor that arises from neural crest cells...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Kelly šūnu līnija ir cilvēka neiroblastomas šūnu līnija, kas iegūta no audzēja biopsijas. Neiroblastoma ir ļaundabīgs audzējs, kas rodas no nervu kores šūnām un parasti skar bērnus un zīdaiņus. Kelly šūnas tiek plaši izmantotas pētniecībā, jo tām piemīt agresīvas augšanas īpašības un spēja noteiktos apstākļos diferencēties par neironiem līdzīgām šūnām. Šīm šūnām piemīt neiroblastomai raksturīgas īpašības, tostarp augsts MYCN amplifikācijas līmenis, kas ir saistīts ar sliktu prognozi un agresīvu audzēja uzvedību. Tas padara Kelly šūnu līniju par vērtīgu modeli neiroblastomas molekulāro mehānismu izpētei un potenciālo terapeitisko līdzekļu testēšanai.

Kelly šūnas kultūrā ir adherentas un var augt monoslānī, tāpēc tās ir piemērotas dažādiem eksperimentāliem lietojumiem, tostarp zāļu skrīningam, gēnu ekspresijas pētījumiem un šūnu signalizācijas ceļu izpētei. Tās ir īpaši noderīgas, lai pētītu MYCN izraisītas onkoģenēzes ietekmi un novērtētu neiroblastomas mērķterapijas efektivitāti. Kelly šūnu līnija kalpo arī kā modelis, lai izprastu neiroblastomas metastāžu bioloģiju, jo šīm šūnām ir spēja migrēt un invadēt, atspoguļojot agresīvas neiroblastomas uzvedību in vivo.

Audums
Smadzenes
Slimība
Neuroblastoma
Sinonīmi
  • KELLY
  • NB19
  • NB-19
  • NB19-RIKEN

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Tumorogēns
Jā, kailām pelēm.
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
30 stundas

04Identifikatori

Atsauce
Kelly (Cytion kataloga numurs 300317)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2092

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
Negatīvs uz HPV (cilvēka papilomas vīrusu)
Produkti
N-myc RnA

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
1 gads
Etniskā piederība
Kaukāzietis