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Kelly
Tecido
Cérebro
Doença
Neuroblastoma
Sinónimos
KELLY, NB19, NB-19, NB19-RIKEN

Documentos

Kelly

Cell line · Número do produto 300317

The Kelly cell line is a human neuroblastoma cell line derived from a tumor biopsy. Neuroblastoma is a malignant tumor that arises from neural crest cells...

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
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1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular Kelly é uma linha celular de neuroblastoma humano derivada de uma biopsia de tumor. O neuroblastoma é um tumor maligno que surge a partir de células da crista neural, afectando normalmente crianças e bebés. As células Kelly são amplamente utilizadas na investigação devido às suas caraterísticas de crescimento agressivo e à sua capacidade de se diferenciarem em células semelhantes a neurónios em condições específicas. Estas células apresentam propriedades típicas do neuroblastoma, incluindo níveis elevados de amplificação MYCN, que está associada a um mau prognóstico e a um comportamento agressivo do tumor. Este facto faz da linha celular Kelly um modelo valioso para estudar os mecanismos moleculares do neuroblastoma e para testar potenciais agentes terapêuticos.

As células Kelly são aderentes em cultura e podem crescer numa monocamada, o que as torna adequadas para uma vasta gama de aplicações experimentais, incluindo o rastreio de fármacos, estudos de expressão genética e investigações sobre as vias de sinalização celular. São particularmente úteis para estudar os efeitos da oncogénese induzida por MYCN e para avaliar a eficácia de terapias orientadas contra o neuroblastoma. A linha celular Kelly também serve de modelo para compreender a biologia das metástases do neuroblastoma, uma vez que estas células têm a capacidade de migrar e invadir, reflectindo o comportamento do neuroblastoma agressivo in vivo.

Tecido
Cérebro
Doença
Neuroblastoma
Sinónimos
  • KELLY
  • NB19
  • NB-19
  • NB19-RIKEN

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus.
Tempo de duplicação
30 horas

04Identificadores

Referência
Kelly (número de catálogo Cytion 300317)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2092

05Expressão e suscetibilidade

Vírus
Negativo para HPV (vírus do papiloma humano)
Produtos
N-myc RnA

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
1 ano
Etnia
Caucasiano