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Kelly
Pañuelo de papel
Cerebro
Enfermedad
Neuroblastoma
Sinónimos
KELLY, NB19, NB-19, NB19-RIKEN

Documentos

Kelly

Cell line · Número de producto 300317

The Kelly cell line is a human neuroblastoma cell line derived from a tumor biopsy. Neuroblastoma is a malignant tumor that arises from neural crest cells...

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Personalización / Recomendaciones

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Lote
Recomendado (lote más fresco)
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1

01Información general

Descripción

La línea celular Kelly es una línea celular de neuroblastoma humano derivada de una biopsia tumoral. El neuroblastoma es un tumor maligno que se origina en las células de la cresta neural y que suele afectar a niños y bebés. Las células de Kelly se utilizan ampliamente en investigación debido a sus características de crecimiento agresivo y su capacidad para diferenciarse en células similares a las neuronas en condiciones específicas. Estas células presentan propiedades típicas del neuroblastoma, como altos niveles de amplificación de MYCN, que se asocia con un mal pronóstico y un comportamiento tumoral agresivo. Esto convierte a la línea celular Kelly en un modelo valioso para estudiar los mecanismos moleculares del neuroblastoma y para probar posibles agentes terapéuticos.

Las células Kelly son adherentes en cultivo y pueden crecer en monocapa, lo que las hace adecuadas para una amplia gama de aplicaciones experimentales, como el cribado de fármacos, los estudios de expresión génica y las investigaciones de las vías de señalización celular. Son especialmente útiles para estudiar los efectos de la oncogénesis impulsada por MYCN y para evaluar la eficacia de terapias dirigidas contra el neuroblastoma. La línea celular Kelly también sirve como modelo para comprender la biología de la metástasis del neuroblastoma, ya que estas células tienen la capacidad de migrar e invadir, reflejando el comportamiento del neuroblastoma agresivo in vivo.

Pañuelo de papel
Cerebro
Enfermedad
Neuroblastoma
Sinónimos
  • KELLY
  • NB19
  • NB-19
  • NB19-RIKEN

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Tumorigénico
Sí, en ratones desnudos.
Tiempo de duplicación
30 horas

04Identificadores

Referencia
Kelly (número de catálogo Cytion 300317)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2092

05Expresión y susceptibilidad

Virus
Negativo para el VPH (virus del papiloma humano)
Productos
N-myc RnA

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
1 año
Origen étnico
Caucásico