Ga naar de inhoud
Kelly
Weefsel
Hersenen
Ziekte
Neuroblastoom
Synoniemen
KELLY, NB19, NB-19, NB19-RIKEN

Documenten

Kelly

Cell line · Productnummer 300317

The Kelly cell line is a human neuroblastoma cell line derived from a tumor biopsy. Neuroblastoma is a malignant tumor that arises from neural crest cells...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De Kelly-cellijn is een menselijke neuroblastoomcellijn afkomstig van een tumorbiopsie. Neuroblastoom is een kwaadaardige tumor die ontstaat uit neurale lijstcellen en meestal kinderen en zuigelingen treft. Kelly-cellen worden veel gebruikt in onderzoek vanwege hun agressieve groeikenmerken en hun vermogen om te differentiëren in neuronachtige cellen onder specifieke omstandigheden. Deze cellen vertonen eigenschappen die typisch zijn voor neuroblastoom, waaronder een hoog niveau van MYCN-amplificatie, wat wordt geassocieerd met een slechte prognose en agressief tumorgedrag. Dit maakt de Kelly cellijn een waardevol model voor het bestuderen van de moleculaire mechanismen van neuroblastoom en voor het testen van potentiële therapeutische middelen.

Kelly cellen zijn adherent in cultuur en kunnen groeien in een monolaag, waardoor ze geschikt zijn voor een breed scala aan experimentele toepassingen, waaronder het screenen van medicijnen, genexpressiestudies en onderzoeken naar cellulaire signaalwegen. Ze zijn vooral nuttig voor het bestuderen van de effecten van MYCN-gedreven oncogenese en voor het evalueren van de werkzaamheid van doelgerichte therapieën tegen neuroblastoom. De Kelly-cellijn dient ook als model voor het begrijpen van de biologie van neuroblastoommetastase, omdat deze cellen kunnen migreren en invaseren, wat het gedrag van agressieve neuroblastomen in vivo weerspiegelt.

Weefsel
Hersenen
Ziekte
Neuroblastoom
Synoniemen
  • KELLY
  • NB19
  • NB-19
  • NB19-RIKEN

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen.
Verdubbelingstijd
30 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
Kelly (Cytion catalogusnummer 300317)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2092

05Expressie en vatbaarheid

Virussen
Negatief voor HPV (humaan papillomavirus)
Producten
N-myc RnA

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
1 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch