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Kelly
Tessuto
Cervello
Malattia
Neuroblastoma
Sinonimi
KELLY, NB19, NB-19, NB19-RIKEN

Documenti

Kelly

Cell line · Codice prodotto 300317

The Kelly cell line is a human neuroblastoma cell line derived from a tumor biopsy. Neuroblastoma is a malignant tumor that arises from neural crest cells...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare Kelly è una linea cellulare di neuroblastoma umano derivata da una biopsia tumorale. Il neuroblastoma è un tumore maligno che si origina dalle cellule della cresta neurale e colpisce tipicamente bambini e neonati. Le cellule Kelly sono ampiamente utilizzate nella ricerca grazie alle loro caratteristiche di crescita aggressiva e alla loro capacità di differenziarsi in cellule simili ai neuroni in condizioni specifiche. Queste cellule presentano proprietà tipiche del neuroblastoma, tra cui alti livelli di amplificazione di MYCN, che è associata a una prognosi sfavorevole e a un comportamento aggressivo del tumore. Ciò rende la linea cellulare Kelly un modello prezioso per studiare i meccanismi molecolari del neuroblastoma e per testare potenziali agenti terapeutici.

Le cellule Kelly sono aderenti in coltura e possono crescere in un monostrato, il che le rende adatte a un'ampia gamma di applicazioni sperimentali, tra cui lo screening dei farmaci, gli studi di espressione genica e le indagini sulle vie di segnalazione cellulare. Sono particolarmente utili per studiare gli effetti dell'oncogenesi guidata da MYCN e per valutare l'efficacia di terapie mirate contro il neuroblastoma. La linea cellulare Kelly serve anche come modello per comprendere la biologia delle metastasi del neuroblastoma, poiché queste cellule hanno la capacità di migrare e invadere, riflettendo il comportamento del neuroblastoma aggressivo in vivo.

Tessuto
Cervello
Malattia
Neuroblastoma
Sinonimi
  • KELLY
  • NB19
  • NB-19
  • NB19-RIKEN

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Tumorigenico
Sì, in topi nudi.
Tempo di raddoppio
30 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
Kelly (numero di catalogo Cytion 300317)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2092

05Espressione e suscettibilità

Virus
Negativo per HPV (Human Papilloma Virus)
Prodotti
N-myc RnA

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
1 anno
Etnia
Caucasico