Μετάβαση στο περιεχόμενο
Kelly
Ιστός
Εγκέφαλος
Ασθένεια
Νευροβλάστωμα
Συνώνυμα
KELLY, NB19, NB-19, NB19-RIKEN

Έγγραφα

Kelly

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300317

The Kelly cell line is a human neuroblastoma cell line derived from a tumor biopsy. Neuroblastoma is a malignant tumor that arises from neural crest cells...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά Kelly είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά νευροβλαστώματος που προέρχεται από βιοψία όγκου. Το νευροβλάστωμα είναι ένας κακοήθης όγκος που προέρχεται από τα κύτταρα της νευρικής κορυφής και προσβάλλει συνήθως παιδιά και βρέφη. Τα κύτταρα Kelly χρησιμοποιούνται εκτενώς στην έρευνα λόγω των επιθετικών χαρακτηριστικών ανάπτυξής τους και της ικανότητάς τους να διαφοροποιούνται σε κύτταρα που μοιάζουν με νευρώνες υπό συγκεκριμένες συνθήκες. Τα κύτταρα αυτά παρουσιάζουν ιδιότητες χαρακτηριστικές του νευροβλαστώματος, συμπεριλαμβανομένων υψηλών επιπέδων ενίσχυσης του MYCN, η οποία σχετίζεται με κακή πρόγνωση και επιθετική συμπεριφορά του όγκου. Αυτό καθιστά την κυτταρική σειρά Kelly ένα πολύτιμο μοντέλο για τη μελέτη των μοριακών μηχανισμών του νευροβλαστώματος και για τη δοκιμή πιθανών θεραπευτικών παραγόντων.

Τα κύτταρα Kelly είναι προσκολλημένα στην καλλιέργεια και μπορούν να αναπτυχθούν σε μονοστρωματική μορφή, γεγονός που τα καθιστά κατάλληλα για ένα ευρύ φάσμα πειραματικών εφαρμογών, όπως η διαλογή φαρμάκων, οι μελέτες γονιδιακής έκφρασης και οι έρευνες σχετικά με τα μονοπάτια κυτταρικής σηματοδότησης. Είναι ιδιαίτερα χρήσιμα για τη μελέτη των επιδράσεων της ογκογένεσης που οδηγείται από τον MYCN και για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας των στοχευμένων θεραπειών κατά του νευροβλαστώματος. Η κυτταρική σειρά Kelly χρησιμεύει επίσης ως μοντέλο για την κατανόηση της βιολογίας της μετάστασης του νευροβλαστώματος, καθώς τα κύτταρα αυτά έχουν την ικανότητα να μεταναστεύουν και να εισβάλλουν, αντανακλώντας τη συμπεριφορά του επιθετικού νευροβλαστώματος in vivo.

Ιστός
Εγκέφαλος
Ασθένεια
Νευροβλάστωμα
Συνώνυμα
  • KELLY
  • NB19
  • NB-19
  • NB19-RIKEN

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Ογκογόνος
Ναι, σε γυμνά ποντίκια.
Χρόνος διπλασιασμού
30 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
Kelly (αριθμός καταλόγου Cytion 300317)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_2092

05Έκφραση και ευαισθησία

Ιοί
Αρνητικό για HPV (ιός των ανθρώπινων θηλωμάτων)
Προϊόντα
N-myc RnA

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
1 έτος
Εθνικότητα
Καυκάσιος