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NB-4
Gewebe
Knochenmark
Krankheit
Akute promyelozytäre Leukämie
Synonyme
NB4, NB.4

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NB-4

Cell line · Artikelnummer 300299

NB-4 cells are a human acute promyelocytic leukemia (APL) cell line established from the bone marrow of a patient experiencing the second relapse of acute...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

NB-4-Zellen sind eine menschliche Zelllinie der akuten promyelozytären Leukämie (APL), die aus dem Knochenmark eines Patienten gewonnen wurde, der einen zweiten Rückfall der akuten promyelozytären Leukämie erlitt. Diese Zelllinie zeichnet sich durch das Vorhandensein der chromosomalen Translokation t(15;17) aus, aus der das PML-RARα-Fusionsgen resultiert, ein Markenzeichen der APL. Die NB4-Zelllinie dient als zentrales Modell für die Untersuchung der Pathogenese der APL und der Wirkmechanismen von Therapeutika, die die Differenzierung induzieren, wie Retinsäure (ATRA) und Arsentrioxid (ATO).

Als Zelllinie der promyelozytären Leukämie weisen NB-4-Zellen ein aberrantes Differenzierungsmuster auf, das für die APL charakteristisch ist. Diese Abweichung bietet einen einzigartigen Einblick in die zellulären Mechanismen, die dem Fortschreiten der Leukämie zugrunde liegen, sowie in das Potenzial für therapeutische Eingriffe. Die Fähigkeit der NB-4-Zellen, bei Exposition gegenüber bestimmten Chemotherapeutika oder Differenzierungsinduktoren wie Retinsäure dem programmierten Zelltod zu unterliegen, macht sie zu einem unschätzbaren Instrument für die Untersuchung der Zellapoptose im Zusammenhang mit Leukämie. Die NB-4-Zelllinie weist auch ein bilineares Potenzial auf, was ihre Fähigkeit unterstreicht, sich unter bestimmten Bedingungen in mehrere hämatopoetische Linien zu differenzieren.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die NB-4-Zelllinie mit ihren einzigartigen Eigenschaften und ihrer Reaktionsfähigkeit auf Differenzierungsinduktoren wie Retinsäure weiterhin eine wichtige Ressource für Forscher darstellt, die sich mit den Feinheiten der promyelozytären Leukämie und dem breiteren Feld der Onkologie befassen.

Gewebe
Knochenmark
Krankheit
Akute promyelozytäre Leukämie
Synonyme
  • NB4
  • NB.4

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Runde Zellen
Zelltyp
B-Lymphozyt
Karyotyp
T(15,17) (q22,q11-12) Translokation
Verdopplungszeit
35 bis 40 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
NB-4 (Cytion Katalognummer 300299)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0005

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
CD4+, CD14-, CD36-
Reverse Transkriptase
Negativ

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Subkultivierung
Halten Sie die Kulturen aufrecht, indem Sie regelmäßig Medium hinzufügen oder austauschen. Beginnen Sie die Kulturen mit einer Dichte von 5 x 105 Zellen/ml und halten Sie die Zellkonzentration im Bereich von 3 x 105 bis 1 x 106 Zellen/ml, um ein optimales Wachstum zu erzielen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
23 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch