NB-4
Cell line · Product number 300299
NB-4 cells are a human acute promyelocytic leukemia (APL) cell line established from the bone marrow of a patient experiencing the second relapse of acute...
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01General information
- Description
As células NB-4 são uma linhagem celular de leucemia promielocítica aguda (LPA) humana, estabelecida a partir da medula óssea de um paciente que apresentava a segunda recidiva da leucemia promielocítica aguda. Essa linhagem celular é caracterizada pela presença da translocação cromossômica t(15;17), que resulta no gene de fusão PML-RARα, uma característica marcante da LPA. A linhagem celular NB-4 serve como um modelo fundamental para o estudo da patogênese da LPA e dos mecanismos de ação de agentes terapêuticos que induzem a diferenciação, como o ácido retinóico (ATRA) e o trióxido de arsênico (ATO).
Como uma linhagem celular de leucemia promielocítica, as células NB-4 exibem um padrão aberrante de diferenciação característico da LPA. Essa aberração oferece uma perspectiva única sobre os mecanismos celulares subjacentes à progressão da leucemia e o potencial para intervenção terapêutica. A capacidade das células NB-4 de sofrerem apoptose, ou morte celular programada, após a exposição a certos agentes quimioterápicos ou indutores de diferenciação, como o ácido retinóico, torna-as uma ferramenta inestimável para o estudo da apoptose celular no contexto da leucemia. A linhagem celular NB-4 também demonstra potencial bilinear, destacando sua capacidade de se diferenciar ao longo de múltiplas linhagens hematopoiéticas sob condições específicas.
Em conclusão, a linhagem celular NB-4, com suas propriedades únicas e sua capacidade de resposta a indutores de diferenciação como o ácido retinóico, continua sendo um recurso fundamental para pesquisadores que se dedicam a desvendar as complexidades da leucemia promielocítica e do campo mais amplo da oncologia.
- Tissue
- Medula óssea
- Disease
- Leucemia promielocítica aguda
- Synonyms
- NB4
- NB.4
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Células redondas
- Cell type
- Linfócito B
- Karyotype
- Translocação T(15,17) (q22,q11-12)
- Doubling time
- 35 a 40 horas
04Identifiers
- Citation
- NB-4 (número de catálogo da Cytion 300299)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0005
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- CD4+, CD14-, CD36-
- Reverse transcriptase
- Negativo
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Subculturing
- Mantenha as culturas adicionando ou substituindo periodicamente o meio. Inicie as culturas com uma densidade de 5 x 10⁵ células/ml e mantenha a concentração celular dentro do intervalo de 3 x 10⁵ a 1 x 10⁶ células/ml para um crescimento ideal.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 23 anos
- Ethnicity
- caucasiano
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
