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NB-4
Tessuto
Midollo osseo
Malattia
Leucemia promielocitica acuta
Sinonimi
NB4, NB.4

Documenti

NB-4

Cell line · Codice prodotto 300299

NB-4 cells are a human acute promyelocytic leukemia (APL) cell line established from the bone marrow of a patient experiencing the second relapse of acute...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
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1

01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule NB-4 sono una linea cellulare umana di leucemia promielocitica acuta (APL) ottenuta dal midollo osseo di un paziente alla seconda recidiva di leucemia promielocitica acuta. Questa linea cellulare è caratterizzata dalla presenza della traslocazione cromosomica t(15;17), che determina la fusione del gene PML-RARα, un segno distintivo dell'APL. La linea cellulare NB4 è un modello fondamentale per studiare la patogenesi dell'APL e i meccanismi d'azione di agenti terapeutici che inducono la differenziazione, come l'acido retinoico (ATRA) e il triossido di arsenico (ATO).

Come linea cellulare di leucemia promielocitica, le cellule NB-4 presentano un modello di differenziazione aberrante, caratteristico dell'APL. Questa aberranza fornisce una finestra unica sui meccanismi cellulari alla base della progressione della leucemia e sul potenziale di intervento terapeutico. La capacità delle cellule NB-4 di subire l'apoptosi, o morte cellulare programmata, in seguito all'esposizione a determinati agenti chemioterapici o induttori di differenziazione come l'acido retinoico, le rende uno strumento prezioso per lo studio dell'apoptosi cellulare nel contesto della leucemia. La linea cellulare NB-4 dimostra anche un potenziale bilineare, evidenziando la sua capacità di differenziarsi lungo più lignaggi ematopoietici in condizioni specifiche.

In conclusione, la linea cellulare NB-4, con le sue proprietà uniche e la sua reattività agli induttori di differenziazione come l'acido retinoico, continua a essere una risorsa fondamentale per i ricercatori che si occupano delle complessità della leucemia promielocitica e del più ampio campo dell'oncologia.

Tessuto
Midollo osseo
Malattia
Leucemia promielocitica acuta
Sinonimi
  • NB4
  • NB.4

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Celle rotonde
Tipo di cellula
Linfocita B
Cariotipo
Traslocazione T(15,17) (q22,q11-12)
Tempo di raddoppio
da 35 a 40 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
NB-4 (numero di catalogo Cytion 300299)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0005

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
CD4+, CD14-, CD36-
Trascriptasi inversa
Negativo

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Subcoltura
Mantenere le colture aggiungendo o sostituendo periodicamente il terreno. Avviare le colture con una densità di 5 x 105 cellule/ml e mantenere la concentrazione cellulare compresa tra 3 x 105 e 1 x 106 cellule/ml per una crescita ottimale.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
23 anni
Etnia
Caucasico