Mine otse sisu juurde
CLS-ACI-1
Kude
Rind
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
CLS-ACI-I

Dokumendid

CLS-ACI-1

Cell line · Toote number 500459

The CLS-ACI-1 cell line was established in 1998 from a solid mammary carcinoma, which was induced in a model organism through oral administration of 7,12-...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

CLS-ACI-1 rakuliin loodi 1998. aastal tahkest rinnanäärmekartsinoomist, mis indutseeriti mudelorganismis 7,12-dimetüülbenso[a]antratseeni (DMBA) suukaudse manustamisega annuses 20 mg kehakaalu kilogrammi kohta. DMBA on tuntud tugev mutageen ja kantserogeen, mida tavaliselt kasutatakse eksperimentaalses onkoloogias vähi indutseerimiseks, eriti rinnavähi uuringutes. CLS-ACI-1 rakuliini loomine kasvajakoes võimaldab rinnavähi bioloogia ulatuslikku in vitro uurimist, eelkõige selliste keemiliste ainete nagu DMBA poolt algatatud kantserogeneesi mehhanismide mõistmiseks.

CLS-ACI-1 rakuliini abil tehtavad in vitro uuringud annavad olulise ülevaate rinnanäärmekartsinoomiga seotud rakkude ja geneetiliste muutuste kohta. See rakuliin on väärtuslik vahend onkoloogilistes uuringutes, sealhulgas ravimite testimisel, resistentsusmehhanismide ja rakkude reaktsiooni farmakoloogilistele ainetele. Pideva rakuliinina pakub CLS-ACI-1 järjepidevat ja korratavat mudelit rinnavähi progresseerumise ja ravi uurimiseks, hõlbustades tõhusamate ravistrateegiate väljatöötamist sarnaste keemiliste ainete poolt inimestel esilekutsutud kantsinoomide vastu.

Kude
Rind
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
  • CLS-ACI-I

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Adhesiivne ja suspensioon
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel, ACI-rottidel
Karyotüüp
Peaaegu triploidne. 88.4% näitab 51-69 kromosoomi, 5% 38-50 kromosoomi, 6,6% peaaegu tetraploidset või kõrgemat ploidia taset.

04Tunnused

Viide
CLS-ACI-1 (Cytioni katalooginumber 500459)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_5729

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Onkogeenid
Mycn geeni üleekspressioon.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Koguge suspensioonirakud 15 ml tuubi ja peske kleepunud rakud ettevaatlikult PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium (kasutage 3-5 ml T25 kolbide puhul ja 5-10 ml T75 kolbide puhul). Kandke Accutase'i (1-2 ml T25 kolvidesse, 2,5 ml T75 kolvidesse), tagades rakukihi täieliku katvuse. Laske rakkudel 10 minutit toatemperatuuril inkubeerida. Pärast inkubeerimist ühendage ja tsentrifuugige nii suspensioon kui ka adherentsed rakud. Pärast tsentrifuugimist resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult ja kandke rakususpensioon uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet.
Külvitihedus
2 x 104 rakku/cm2 moodustavad umbes 6–7 päeva jooksul konfluentse kihi.
Vedeliku vahetus
Iga 3 kuni 5 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
ACI
Doonori vanus
3 kuud