Pāriet uz saturu
CLS-ACI-1
Audums
Krūtis
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
CLS-ACI-I

Dokumenti

CLS-ACI-1

Cell line · Preces numurs 500459

The CLS-ACI-1 cell line was established in 1998 from a solid mammary carcinoma, which was induced in a model organism through oral administration of 7,12-...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

CLS-ACI-1 šūnu līnija tika izveidota 1998. gadā no cietas krūts karcinomas, kas tika inducēta modeļa organismā, perorāli ievadot 7,12-dimetilbenzo[a]antracēnu (DMBA) 20 mg uz kilogramu ķermeņa svara. DMBA ir labi zināms spēcīgs mutagēns un kancerogēns, ko bieži izmanto eksperimentālajā onkoloģijā vēža izraisīšanai, jo īpaši pētījumos, kas saistīti ar krūts vēzi. CLS-ACI-1 šūnu līnijas izveide no audzēja audiem ļauj veikt plašus krūts vēža bioloģijas pētījumus in vitro, jo īpaši, lai izprastu kancerogenēzes mehānismus, ko ierosina tādi ķīmiskie aģenti kā DMBA.

In vitro pētījumi, izmantojot CLS-ACI-1 šūnu līniju, sniedz būtisku ieskatu par šūnu ceļiem un ģenētiskajām izmaiņām, kas saistītas ar krūts karcinomu. Šī šūnu līnija kalpo kā vērtīgs instruments onkoloģiskiem pētījumiem, tostarp zāļu testēšanai, rezistences mehānismiem un šūnu reakcijai uz farmakoloģiskiem līdzekļiem. CLS-ACI-1 kā nepārtraukta šūnu līnija piedāvā konsekventu un reproducējamu modeli krūts vēža progresēšanas un ārstēšanas izpētei, veicinot efektīvāku terapeitisko stratēģiju izstrādi pret līdzīgām karcinomām, ko cilvēkiem izraisa ķīmiskas vielas.

Audums
Krūtis
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
  • CLS-ACI-I

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Adhēzija un suspensija
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm, ACI žurkām
Kariotips
Gandrīz triploīds. 88.4% ar 51-69 hromosomām, 5% ar 38-50 hromosomām, 6,6% tuvu tetraploīdiem vai augstākā ploidijas līmenī.

04Identifikatori

Atsauce
CLS-ACI-1 (Cytion kataloga numurs 500459)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_5729

05Pazīmes un uzņēmība

Onkogēni
Mycn gēna pārmērīga ekspresija.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Savāc suspensijas šūnas 15 ml mēģenē un saudzīgi izmazgā pielipušās šūnas ar PBS bez kalcija un magnija (T25 kolbām izmanto 3-5 ml, bet T75 kolbām - 5-10 ml). Uzklājiet Accutase (1-2 ml T25 kolbām, 2,5 ml T75 kolbām), nodrošinot pilnīgu šūnu slāņa pārklājumu. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 10 minūtes. Pēc inkubācijas apvienot un centrifugēt gan suspensiju, gan pielipušās šūnas. Pēc centrifugēšanas uzmanīgi resuspendēt šūnu granulas un pārvietot šūnu suspensiju jaunās kolbās ar svaigu barotni.
Sēšanas blīvums
2 x 104 šūnas/cm2 veidos konfluentu slāni apmēram 6 līdz 7 dienu laikā.
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 3 līdz 5 dienām
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
ACI
Donora vecums
3 mēneši