Siirry sisältöön
CLS-ACI-1
Kudos
Rinta
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
CLS-ACI-I

Asiakirjat

CLS-ACI-1

Cell line · Tuotenumero 500459

The CLS-ACI-1 cell line was established in 1998 from a solid mammary carcinoma, which was induced in a model organism through oral administration of 7,12-...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

CLS-ACI-1-solulinja perustettiin vuonna 1998 kiinteästä rintarauhaskarsinoomasta, joka indusoitiin malliorganismissa antamalla 7,12-dimetyylibentso[a]antraseenia (DMBA) suun kautta annoksella 20 mg painokiloa kohti. DMBA on tunnetusti voimakas mutageeni ja karsinogeeni, jota käytetään yleisesti kokeellisessa onkologiassa syöpien indusoimiseen, erityisesti rintasyöpään liittyvissä tutkimuksissa. CLS-ACI-1-solulinjan perustaminen kasvainkudoksesta mahdollistaa rintasyövän biologian laajan in vitro -tutkimuksen, erityisesti DMBA:n kaltaisten kemiallisten aineiden käynnistämän karsinogeneesin mekanismien ymmärtämiseksi.

CLS-ACI-1-solulinjalla tehdyt in vitro -tutkimukset tarjoavat ratkaisevan tärkeää tietoa solupoluista ja geneettisistä muutoksista, jotka liittyvät rintasyövän syntyyn. Tämä solulinja toimii arvokkaana välineenä onkologisessa tutkimuksessa, mukaan lukien lääkkeiden testaus, resistenssimekanismit ja solujen vaste farmakologisille aineille. Jatkuvana solulinjana CLS-ACI-1 tarjoaa johdonmukaisen ja toistettavan mallin rintasyövän etenemisen ja hoidon tutkimiseen, mikä helpottaa tehokkaampien hoitostrategioiden kehittämistä samanlaisia kemiallisten aineiden ihmisissä aiheuttamia karsinoomia vastaan.

Kudos
Rinta
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
  • CLS-ACI-I

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Adheesio ja suspensio
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä, ACI-rotalla
Karyotyyppi
Lähes triploidi. 88.4 %:lla 51-69 kromosomia, 5 %:lla 38-50 kromosomia, 6,6 %:lla lähes tetraploidinen tai korkeampi ploidiataso.

04Tunnisteet

Lähdeviite
CLS-ACI-1 (Cytionin luettelonumero 500459)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_5729

05Ilmentyminen ja alttius

Onkogeenit
Mycn-geenin yliekspressio.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Kerää suspensiosolut 15 ml:n putkeen ja pese kiinni olevat solut varovasti PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml T25-pulloissa ja 5-10 ml T75-pulloissa). Levitä Accutasea (1-2 ml T25-pulloihin, 2,5 ml T75-pulloihin) varmistaen, että solukerros peittyy kokonaan. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 10 minuuttia. Inkuboinnin jälkeen yhdistetään ja sentrifugoidaan sekä suspensio että adherentit solut. Sentrifugoinnin jälkeen solupelletti suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensio uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
2 x 104 solua/cm2 tuottaa yhtenäisen kerroksen noin 6–7 päivässä.
Nesteen uusiminen
3-5 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
ACI
Luovuttajan ikä
3 kuukautta