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CLS-ACI-1
Tessuto
Seno
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
CLS-ACI-I

Documenti

CLS-ACI-1

Cell line · Codice prodotto 500459

The CLS-ACI-1 cell line was established in 1998 from a solid mammary carcinoma, which was induced in a model organism through oral administration of 7,12-...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare CLS-ACI-1 è stata creata nel 1998 a partire da un carcinoma mammario solido, che è stato indotto in un organismo modello attraverso la somministrazione orale di 7,12-dimetilbenzo[a]antracene (DMBA) alla dose di 20 mg per chilogrammo di peso corporeo. Il DMBA è un noto potente mutageno e cancerogeno che viene comunemente utilizzato in oncologia sperimentale per l'induzione di tumori, in particolare negli studi relativi al cancro al seno. La creazione della linea cellulare CLS-ACI-1 dal tessuto tumorale consente un'ampia esplorazione in vitro della biologia del cancro al seno, in particolare per comprendere i meccanismi della carcinogenesi avviata da agenti chimici come la DMBA.

Gli studi in vitro condotti con la linea cellulare CLS-ACI-1 forniscono approfondimenti cruciali sulle vie cellulari e sulle alterazioni genetiche associate ai carcinomi mammari. Questa linea cellulare è uno strumento prezioso per la ricerca oncologica, compresi i test sui farmaci, i meccanismi di resistenza e la risposta cellulare agli agenti farmacologici. Come linea cellulare continua, CLS-ACI-1 offre un modello coerente e replicabile per studiare la progressione e il trattamento del carcinoma mammario, facilitando lo sviluppo di strategie terapeutiche più efficaci contro carcinomi simili indotti da agenti chimici nell'uomo.

Tessuto
Seno
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
  • CLS-ACI-I

02Classificazione

Organismo
Ratto
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente e in sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi, ACI-rat
Cariotipo
Quasi triploide. 88.il 4% presenta 51-69 cromosomi, il 5% 38-50 cromosomi, il 6,6% quasi tetraploide o un livello di ploidia superiore.

04Identificatori

Riferimento bibliografico
CLS-ACI-1 (numero di catalogo Cytion 500459)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5729

05Espressione e suscettibilità

Oncogeni
Sovraespressione del gene Mycn.

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Raccogliere le cellule in sospensione in una provetta da 15 ml e lavare delicatamente le cellule aderenti con PBS privo di calcio e magnesio (utilizzare 3-5 ml per le fiasche T25 e 5-10 ml per le fiasche T75). Applicare Accutase (1-2 ml per le beute T25, 2,5 ml per le beute T75) assicurando la copertura completa dello strato cellulare. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 10 minuti. Dopo l'incubazione, unire e centrifugare sia la sospensione che le cellule aderenti. Dopo la centrifugazione, risospendere accuratamente il pellet cellulare e trasferire la sospensione cellulare in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
2 x 104 cellule/cm2 produrranno uno strato confluente in circa 6-7 giorni.
Rinnovo dei fluidi
Ogni 3-5 giorni
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
ACI
Età dei donatori
3 mesi