Mine otse sisu juurde
MS751
Kude
Emakakael
Haigus
Inimese papilloomiviirusega seotud emakakaela lamerakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
MS-751, MS 751

Dokumendid

MS751

Cell line · Toote number 305115

MS751 is a tumorigenic human cervical carcinoma cell line isolated from the uterus of a female patient with epidermoid carcinoma. The cells were originall...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

MS751 on inimese emakakaela kartsinoomi kasvajaline rakuliin, mis on isoleeritud epidermoidkartsinoomiga naissoost patsiendi emakast. Rakud saadi algselt metastaatilisest lümfisõlmest ja need moodustavad nude-hiirtele ksenotransplanteerimisel halvasti diferentseerunud epidermoidkartsinoomi (III aste). MS751-rakkude kasvajate ja metastaatiliste omaduste tõttu on need väärtuslik mudel emakakaelavähi metastaaside tekkimise ja kasvajate progresseerumise protsesside uurimiseks. Need rakud on eriti kasulikud epiteeli-mesenhümaalse ülemineku (EMT), invasiivsuse ja metastaasi uurimiseks, eriti seoses halvasti diferentseerunud kantsinoomiga.

MS751 üks peamisi molekulaarseid tunnuseid on inimese papilloomiviiruse (HPV) sekventside olemasolu. Algselt teatati HPV-18 sisaldusest, kuid uuemad uuringud on näidanud, et MS751 rakud sisaldavad HPV-45 osalisi järjestusi, eriti E6/E7 piirkonnast, mis väljenduvad polü(A)+ RNA-na. Onkoproteiinid E6 ja E7 on tuntud oma rolli tõttu vastavalt p53 ja Rb kasvajasupressori funktsioonide häirimisel, mis soodustavad rakkude kontrollimatut jagunemist ja aitavad kaasa onkogeneesile. Nende viiruste järjestuste olemasolu muudab MS751 väga oluliseks HPV-ga seotud emakakaelavähi uuringutes ja konkreetselt selle uurimiseks, kuidas HPV-45 aitab kaasa emakakaelarakkude pahaloomulisusele.

MS751 rakkudel on epiteliaalne morfoloogia, mis on iseloomulik paljudele emakakaelavähi rakuliinidele. Neid kasutatakse laialdaselt HPV-vahendatud kantserogeneesi aluseks olevate molekulaarmehhanismide uurimiseks ning ravimite avastamiseks ja terapeutiliste ravimite skriininguks. Arvestades nende metastaatilist päritolu ja HPV-järjestuse olemasolu, on MS751 oluline mudel emakakaelavähi progresseerumise uurimiseks ja ravistrateegiate testimiseks, mis on suunatud nii viiruse kui ka kasvajaga seotud radadele.

Kude
Emakakael
Haigus
Inimese papilloomiviirusega seotud emakakaela lamerakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
  • MS-751
  • MS 751

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel, moodustab halvasti diferentseerunud epidermoidse kartsinoomi (asteⅢ).

04Tunnused

Viide
MS751 (Cytioni katalooginumber 305115)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_4996

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
Veregrupp AB, Rh+
Viirused
HPV18, HPV45

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS, 1% NEAA ja 1,0 mM naatriumpüruvaadiga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
47 aastat