Pāriet uz saturu
MS751
Audums
Dzemdes kakls
Slimība
Ar cilvēka papilomas vīrusu saistīta dzemdes kakla plakanšūnu karcinoma
Metastāžu vieta
Limfmezgls
Sinonīmi
MS-751, MS 751

Dokumenti

MS751

Cell line · Preces numurs 305115

MS751 is a tumorigenic human cervical carcinoma cell line isolated from the uterus of a female patient with epidermoid carcinoma. The cells were originall...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MS751 ir cilvēka dzemdes kakla karcinomas tumorigēna šūnu līnija, kas izolēta no epidermoīdās karcinomas pacientes dzemdes. Šūnas sākotnēji tika iegūtas no metastātiska limfmezgla, un tās veido vāji diferencētu epidermoīdo karcinomu (III pakāpes), ja tās ksenogrāfē nude pelēm. MS751 šūnu tumorogēnā un metastātiskā daba padara tās par vērtīgu modeli dzemdes kakla vēža metastāzēšanas un audzēja progresēšanas procesu izpētei. Šīs šūnas ir īpaši noderīgas, lai pētītu epitēlija pāreju no epitēlija uz mezenhīmu (EMT), invaziju un metastāzes, īpaši saistībā ar vāji diferencētu karcinomu.

Viena no galvenajām MS751 molekulārajām īpašībām ir cilvēka papilomas vīrusa (HPV) sekvenču klātbūtne. Sākotnēji tika ziņots, ka MS751 šūnās ir HPV-18, bet jaunākos pētījumos ir pierādīts, ka MS751 šūnās ir daļējas HPV-45 sekvences, jo īpaši no E6/E7 reģiona, kas izpaužas kā poli(A)+ RNS. E6 un E7 onkoproteīni ir labi pazīstami ar to lomu, jo tie traucē attiecīgi p53 un Rb audzēja supresora funkcijas, kas veicina nekontrolētu šūnu dalīšanos un sekmē onkoģenēzi. Šo vīrusu sekvenču klātbūtne padara MS751 ļoti būtisku ar HPV saistītu dzemdes kakla vēža pētījumos un jo īpaši pētījumos par to, kā HPV-45 veicina dzemdes kakla šūnu ļaundabīgumu.

MS751 šūnām piemīt epitēlija morfoloģija, kas raksturīga daudzām dzemdes kakla vēža šūnu līnijām. Tās tiek plaši izmantotas HPV izraisītas kancerogēzes molekulāro mehānismu izpētei, kā arī zāļu atklāšanai un terapeitiskajam skrīningam. Ņemot vērā to metastātisko izcelsmi un HPV sekvenču klātbūtni, MS751 ir būtisks modelis dzemdes kakla vēža progresēšanas izpētei un terapeitisko stratēģiju testēšanai, kas vērstas gan uz vīrusu, gan ar audzēju saistītiem ceļiem.

Audums
Dzemdes kakls
Slimība
Ar cilvēka papilomas vīrusu saistīta dzemdes kakla plakanšūnu karcinoma
Metastāžu vieta
Limfmezgls
Sinonīmi
  • MS-751
  • MS 751

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm veido vāji diferencētu epidermoīdo karcinomu (pakāpeⅢ).

04Identifikatori

Atsauce
MS751 (Cytion kataloga numurs 305115)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_4996

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
AB asinsgrupa, Rh+
Vīrusi
HPV18, HPV45

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS, 1% NEAA un 1,0 mM nātrija piruvāta
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
47 gadi