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MS751
Tecido
Colo do útero
Doença
Carcinoma de células escamosas do colo do útero relacionado com o papilomavírus humano
Local da metástase
Nódulo linfático
Sinónimos
MS-751, MS 751

Documentos

MS751

Cell line · Número do produto 305115

MS751 is a tumorigenic human cervical carcinoma cell line isolated from the uterus of a female patient with epidermoid carcinoma. The cells were originall...

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1

01Informações gerais

Descrição

A MS751 é uma linha celular de carcinoma cervical humano tumorigénico isolada do útero de uma doente com carcinoma epidermoide. As células foram originalmente obtidas de um nódulo linfático metastático e formam um carcinoma epidermoide pouco diferenciado (grau III) quando xenografadas em ratinhos nus. A natureza tumorigénica e metastática das células MS751 torna-as um modelo valioso para estudar os processos envolvidos na metástase do cancro do colo do útero e na progressão do tumor. Estas células são particularmente úteis para investigar a transição epitelial-mesenquimal (EMT), a invasão e as metástases, especialmente em relação ao carcinoma pouco diferenciado.

Uma das principais caraterísticas moleculares da MS751 é a presença de sequências do papilomavírus humano (HPV). Inicialmente, foi referido que continham HPV-18, mas estudos mais recentes demonstraram que as células MS751 contêm sequências parciais de HPV-45, particularmente da região E6/E7, que são expressas como ARN poli(A)+. As oncoproteínas E6 e E7 são bem conhecidas pelo seu papel na interrupção das funções supressoras de tumor de p53 e Rb, respetivamente, que promovem a divisão celular descontrolada e contribuem para a oncogénese. A presença destas sequências virais torna a MS751 altamente relevante para estudos sobre cancros do colo do útero associados ao HPV e, especificamente, para investigar a forma como o HPV-45 contribui para a malignidade das células do colo do útero.

As células MS751 apresentam uma morfologia epitelial, que é caraterística de muitas linhas celulares de cancro do colo do útero. São amplamente utilizadas na investigação dos mecanismos moleculares subjacentes à carcinogénese mediada pelo HPV, bem como na descoberta de medicamentos e no rastreio terapêutico. Dada a sua origem metastática e a presença de sequências de HPV, a MS751 constitui um modelo essencial para estudar a progressão do cancro do colo do útero e testar estratégias terapêuticas destinadas a visar tanto as vias virais como as relacionadas com o tumor.

Tecido
Colo do útero
Doença
Carcinoma de células escamosas do colo do útero relacionado com o papilomavírus humano
Local da metástase
Nódulo linfático
Sinónimos
  • MS-751
  • MS 751

02Classificação

Organismo
Humano
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus, forma carcinoma epidermoide pouco diferenciado (grauⅢ).

04Identificadores

Referência
MS751 (número de catálogo da Cytion 305115)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4996

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
Tipo de sangue AB, Rh+
Vírus
HPV18, HPV45

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Suplementar o meio com 10% de FBS, 1% de NEAA e 1,0 mM de piruvato de sódio
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
47 anos