Siirry sisältöön
MS751
Kudos
Kohdunkaula
Sairaus
Ihmisen papilloomavirukseen liittyvä kohdunkaulan levyepiteelisyöpä
Metastaasikohde
Imusolmuke
Synonyymit
MS-751, MS 751

Asiakirjat

MS751

Cell line · Tuotenumero 305115

MS751 is a tumorigenic human cervical carcinoma cell line isolated from the uterus of a female patient with epidermoid carcinoma. The cells were originall...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MS751 on ihmisen kohdunkaulan karsinooman tumorigeeninen solulinja, joka on eristetty epidermoidikarsinoomaa sairastavan naispotilaan kohdusta. Solut on alun perin saatu metastaattisesta imusolmukkeesta, ja ne muodostavat huonosti erilaistunutta epidermoidikarsinoomaa (aste III), kun ne siirretään nude-hiiriin. MS751-solujen tumorigeeninen ja metastaattinen luonne tekee niistä arvokkaan mallin kohdunkaulan syövän metastaasiin ja kasvaimen etenemiseen liittyvien prosessien tutkimiseen. Nämä solut ovat erityisen käyttökelpoisia tutkittaessa epiteelin ja mesenkyymin välistä siirtymää (EMT), invasiota ja metastaasia, erityisesti huonosti erilaistuneen karsinooman osalta.

Yksi MS751:n tärkeimmistä molekyylipiirteistä on ihmisen papilloomaviruksen (HPV) sekvenssien esiintyminen. Alun perin raportoitiin, että se sisältää HPV-18:aa, mutta uudemmissa tutkimuksissa on osoitettu, että MS751-solut sisältävät HPV-45:n osittaisia sekvenssejä, erityisesti E6/E7-alueelta, jotka ilmentyvät poly(A)+ RNA:na. E6- ja E7-onkoproteiinit ovat tunnettuja roolistaan p53:n ja Rb:n kasvainsuppressoritoimintojen häiritsemisessä, mikä edistää kontrolloimatonta solunjakautumista ja edistää onkogeneesiä. Näiden virussekvenssien läsnäolo tekee MS751:stä erittäin tärkeän HPV:hen liittyvien kohdunkaulan syöpien tutkimuksessa ja erityisesti sen tutkimisessa, miten HPV-45 vaikuttaa kohdunkaulan solujen pahanlaatuisuuteen.

MS751-soluilla on epiteelimorfologia, joka on ominaista monille kohdunkaulan syövän solulinjoille. Niitä käytetään laajalti HPV-välitteisen karsinogeneesin taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseen sekä lääkkeiden löytämiseen ja terapeuttiseen seulontaan. Koska MS751-solut ovat metastaattista alkuperää ja niissä esiintyy HPV-sekvenssejä, ne ovat olennainen malli kohdunkaulan syövän etenemisen tutkimiseen ja sellaisten terapeuttisten strategioiden testaamiseen, joilla pyritään vaikuttamaan sekä virukseen että kasvaimeen liittyviin reitteihin.

Kudos
Kohdunkaula
Sairaus
Ihmisen papilloomavirukseen liittyvä kohdunkaulan levyepiteelisyöpä
Metastaasikohde
Imusolmuke
Synonyymit
  • MS-751
  • MS 751

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä muodostaa huonosti erilaistunutta epidermoidikarsinoomaa (asteⅢ).

04Tunnisteet

Lähdeviite
MS751 (Cytionin tuotenumero 305115)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_4996

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
Veriryhmä AB, Rh+
Virukset
HPV18, HPV45

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä, 1 % NEAA:lla ja 1,0 mM natriumpyruvaatilla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
47 vuotta