Siirry sisältöön
5637 Solut
Kudos
Virtsarakko
Sairaus
Syöpä
Metastaasikohde
Ensisijainen kasvainpaikka (virtsarakko)

Asiakirjat

5637 Solut

Cell line · Tuotenumero 300105

5637 on virtsarakon karsinoomasolulinja, joka on eristetty 68-vuotiaan miehen virtsarakosta; miehellä oli II-asteen karsinooma. 5637-solut tuottavat ja erittävät runsaasti...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

5637 on virtsarakon karsinooman solulinja, joka on eristetty 68-vuotiaan miehen virtsarakon II-asteen karsinoomasta. 5637-solut tuottavat ja erittävät useita kasvutekijöitä, kuten SCF:ää, IL-1:tä, IL-6:ta, G-CSF:ää ja GM-CSF:ää. Nämä sytokiinit ovat toiminnallisesti aktiivisia, ja ne voivat olla arvokas lähde kasvutekijöihin reagoivien tai niistä riippuvaisten hematopoieettisten primaarisolujen ja solulinjojen viljelyyn.

5637 solujen karyotyypin modaalinen kromosomiluku on 67, vaihteluväli 59-71. Kromosomien modaalinen kantalinjan kromosomiluku on 67 (36 %) ja polyploidia (0,6 %). Näille soluille on yhteistä 14 merkkikromosomia, mukaan lukien 3q+, 11q+, i(13q), t(9q21q), i(17q), i(21q). Muita merkkiaineita, kuten der(5)t(5;7)(q31;p11) ja 1p, löydettiin vain pienelle osapopulaatiolle spesifisesti, samoin kuin mikrokromosomeja ja kaksoisminuutteja (DM). Joissakin soluissa on yksi tai toisinaan kaksi Y-kromosomia.

5637-solut ovat tumorigeenisiä, ja niiden on osoitettu aiheuttavan kasvaimia nude-hiirille ihon alle inokuloituna. 5637-solujen kaksinkertaistumisaika on noin 24 tuntia. 5637-solujen isoentsyymiprofiili koostuu AK-1:n, ES-D:n, Me-2:n ja PGM1:n isoformista 1, GLO-I:n isoformista 1 ja 2, G6PD:n isoformista B sekä PGM3:n isoformista 2. Onkogeenien osalta 5637-solut ovat positiivisia FGFR3:n, PIK3CA:n, HRAS:n, KRAS:n, NRAS:n, TERT:n ja CDKN2A:n suhteen, mutta negatiivisia TP53:n suhteen, ja ne kuuluvat molekulaariseen virtsarakon syövän alatyyppiin l5637 on virtsarakon karsinooma-solulinja, joka on eristetty 68-vuotiaan miehen virtsarakosta, jolla on II-asteen karsinooma. 5637-solut tuottavat ja erittävät useita kasvutekijöitä, kuten SCF:ää, IL-1:tä, IL-6:ta, G-CSF:ää ja GM-CSF:ää. Nämä sytokiinit ovat toiminnallisesti aktiivisia, ja ne voivat olla arvokas lähde kasvutekijöihin reagoivien tai niistä riippuvaisten hematopoieettisten primaarisolujen ja solulinjojen viljelyyn.

5637 solujen karyotyypin modaalinen kromosomiluku on 67, vaihteluväli 59-71. Kromosomien modaalinen kantalinjan kromosomiluku on 67 (36 %) ja polyploidia (0,6 %). Näille soluille on yhteistä 14 merkkikromosomia, mukaan lukien 3q+, 11q+, i(13q), t(9q21q), i(17q), i(21q). Muita merkkiaineita, kuten der(5)t(5;7)(q31;p11) ja 1p, löydettiin vain pienelle osapopulaatiolle spesifisesti, samoin kuin mikrokromosomeja ja kaksoisminuutteja (DM). Joissakin soluissa on yksi tai toisinaan kaksi Y-kromosomia.

5637-solut ovat tumorigeenisiä, ja niiden on osoitettu aiheuttavan kasvaimia nude-hiirille ihon alle inokuloituna. 5637-solujen kaksinkertaistumisaika on noin 24 tuntia. 5637-solujen isoentsyymiprofiili koostuu AK-1:n, ES-D:n, Me-2:n ja PGM1:n isoformista 1, GLO-I:n isoformista 1 ja 2, G6PD:n isoformista B sekä PGM3:n isoformista 2.

Onkogeenien osalta 5637-solut ovat positiivisia FGFR3:n, PIK3CA:n, HRAS:n, KRAS:n, NRAS:n, TERT:n ja CDKN2A:n suhteen, mutta negatiivisia TP53:n suhteen, ja ne kuuluvat molekyylisesti virtsarakon syövän alatyyppiin luminaali. Yhteenvetona voidaan todeta, että 5637-solut ovat arvokas väline syöpätutkimuksessa erityisesti kasvutekijöiden, solunjakautumisen, onkogeenien ja virtsarakon syövän tutkimisessa.

Kudos
Virtsarakko
Sairaus
Syöpä
Metastaasikohde
Ensisijainen kasvainpaikka (virtsarakko)
Sovellukset
Virtsarakkosyövän tutkimus; hematopoieettisten kasvutekijöiden tuotanto (SCF, IL-1, IL-6, G-CSF, GM-CSF); onkogeenitutkimukset (FGFR3, PIK3CA, HRAS, KRAS, TERT); lääkeherkkyys; transfektiovasta-isäntä; hematopoieettisten viljelmien syöttösolut

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-vapaa
GMO-statuksen tiedot
No genetic modification; wildtype bladder carcinoma cell line
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteelisolut
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä.
Ploidisuus
Kantasolujen modaalinen kromosomiluku on 67, mikä on 36 prosenttia kaikista soluista. Polyploidiaa esiintyy 0,6 prosentissa näistä soluista. Kussakin solussa oli tyypillisesti yksi tai toisinaan kaksi Y-kromosomia.
Karyotyyppi
Fenotyypin frekvenssituote: 0.0056.
Kaksinkertaistumisaika
24 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
5637 (Cytionin luettelonumero 300105)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0126

05Ilmentyminen ja alttius

Isoentsyymit
Me-2, 1, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B
Tuotteet
IL-1, IL-6, G-CFS, GM-CSF, SCF

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista ensin vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreessa väliaineessa ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Jakosuhde
1–5
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2 tuottaa konfluenttisen monokerroksen 3 päivän kuluessa.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
68 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen