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5637 Células
Tecido
Bexiga
Doença
Carcinoma
Local da metástase
Localização do tumor primário (bexiga)

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5637 Células

Cell line · Número do produto 300105

A 5637 é uma linha celular de carcinoma da bexiga isolada da bexiga de um homem de 68 anos com carcinoma de grau II. As células 5637 produzem e secretam...

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01Informações gerais

Descrição

a 5637 é uma linha celular de carcinoma da bexiga isolada da bexiga urinária de um homem de 68 anos com carcinoma de grau II. as células 5637 produzem e segregam vários factores de crescimento, tais como SCF, IL-1, IL-6, G-CSF e GM-CSF. Estas citocinas são funcionalmente activas e podem ser uma fonte valiosa para a cultura de células primárias e linhas celulares hematopoiéticas dependentes ou sensíveis a factores de crescimento.

O número cromossómico modal do cariótipo das 5637 células é 67, variando entre 59 e 71. O número modal de cromossomas da linha estaminal é 67 em 36% e a poliploidia em 0,6%. Catorze cromossomas marcadores são comuns a estas células, incluindo 3q+, 11q+, i(13q), t(9q21q), i(17q), i(21q). Outros marcadores, como der(5)t(5;7)(q31;p11) e 1p, só foram encontrados especificamente numa subpopulação menor, bem como microcromossomas e minutos duplos (DM). Algumas células incluem um ou, ocasionalmente, dois cromossomas Y.

as células 5637 são tumorigénicas e demonstraram induzir tumores em ratinhos nus inoculados por via subcutânea. O tempo de duplicação das células 5637 é de aproximadamente 24 horas. O perfil isoenzimático das células 5637 consiste na isoforma 1 de AK-1, ES-D, Me-2 e PGM1, nas isoformas 1 e 2 de GLO-I, na isoforma B de G6PD, bem como na isoforma 2 de PGM3. Em termos de oncogenes, as células 5637 são positivas para FGFR3, PIK3CA, HRAS, KRAS, NRAS, TERT e CDKN2A, mas negativas para TP53, e pertencem ao subtipo molecular de cancro da bexiga l5637 é uma linha celular de carcinoma da bexiga isolada da bexiga urinária de um homem de 68 anos com carcinoma de grau II. as células 5637 produzem e segregam vários factores de crescimento, tais como SCF, IL-1, IL-6, G-CSF e GM-CSF. Estas citocinas são funcionalmente activas e podem ser uma fonte valiosa para a cultura de células primárias e linhas celulares hematopoiéticas dependentes ou sensíveis a factores de crescimento.

O número cromossómico modal do cariótipo das 5637 células é 67, variando entre 59 e 71. O número modal de cromossomas da linha estaminal é 67 em 36% e a poliploidia em 0,6%. Catorze cromossomas marcadores são comuns a estas células, incluindo 3q+, 11q+, i(13q), t(9q21q), i(17q), i(21q). Outros marcadores, como der(5)t(5;7)(q31;p11) e 1p, só foram encontrados especificamente numa subpopulação menor, bem como microcromossomas e minutos duplos (DM). Algumas células incluem um ou, ocasionalmente, dois cromossomas Y.

as células 5637 são tumorigénicas e demonstraram induzir tumores em ratinhos nus inoculados por via subcutânea. O tempo de duplicação das células 5637 é de aproximadamente 24 horas. O perfil isoenzimático das células 5637 consiste na isoforma 1 de AK-1, ES-D, Me-2 e PGM1, nas isoformas 1 e 2 de GLO-I, na isoforma B de G6PD, bem como na isoforma 2 de PGM3.

Em termos de oncogenes, as células 5637 são positivas para FGFR3, PIK3CA, HRAS, KRAS, NRAS, TERT e CDKN2A, mas negativas para TP53 e pertencem ao subtipo molecular luminal de cancro da bexiga. Em conclusão, as células 5637 são uma ferramenta valiosa para a investigação do cancro, especialmente no que diz respeito ao estudo dos factores de crescimento, da divisão celular, dos oncogenes e do cancro da bexiga.

Tecido
Bexiga
Doença
Carcinoma
Local da metástase
Localização do tumor primário (bexiga)
Aplicações
Investigação sobre o cancro da bexiga; produção de fatores de crescimento hematopoiéticos (SCF, IL-1, IL-6, G-CSF, GM-CSF); estudos sobre oncogenes (FGFR3, PIK3CA, HRAS, KRAS, TERT); sensibilidade aos fármacos; hospedeiro de transfecção; células alimentadoras para culturas hematopoiéticas

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
Sem OGM
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
No genetic modification; wildtype bladder carcinoma cell line
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliais
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus.
Estado de ploidia
O número modal de cromossomas das células da linha estaminal é 67, compreendendo 36% do total. A poliploidia ocorre em 0,6% destas células. Cada célula tinha tipicamente um ou, ocasionalmente, dois cromossomas Y.
Cariótipo
Produto de frequência fenotípica: 0.0056.
Tempo de duplicação
24 horas

04Identificadores

Referência
5637 (número de catálogo Cytion 300105)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0126

05Expressão e suscetibilidade

Isoenzimas
Me-2, 1, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B
Produtos
IL-1, IL-6, G-CFS, GM-CSF, SCF

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Em primeiro lugar, remover o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Para os frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e, para os frascos T75, utilizar 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 5
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm² resultará numa monocamada confluente em 3 dias.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
68 anos
Etnia
Caucasiano