Pāriet uz saturu
5637 Šūnas
Audums
Pūslis
Slimība
Karcinoma
Metastāžu vieta
Primārā audzēja lokalizācija (urīnpūslis)

Dokumenti

5637 Šūnas

Cell line · Preces numurs 300105

5637 ir urīnpūšļa karcinomas šūnu līnija, kas izdalīta no 68 gadus veca vīrieša urīnpūšļa, kuram bija II pakāpes karcinoma. 5637 šūnas ražo un izdalī...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

5637 ir urīnpūšļa karcinomas šūnu līnija, kas izolēta no 68 gadus veca vīrieša urīnpūšļa ar II pakāpes karcinomu. 5637 šūnas ražo un izdala vairākus augšanas faktorus, piemēram, SCF, IL-1, IL-6, G-CSF un GM-CSF. Šie citokīni ir funkcionāli aktīvi un var būt vērtīgs avots, lai kultivētu pret augšanas faktoriem reaģējošas vai atkarīgas hematopoētiskās primārās šūnas un šūnu līnijas.

5637 šūnu kariotipa modālais hromosomu skaits ir 67, no 59 līdz 71. Cilmes līnijas modālais hromosomu skaits ir 67 - 36 % un poliploīdijas - 0,6 %. Šīm šūnām ir kopīgas četrpadsmit marķieru hromosomas, tostarp 3q+, 11q+, i(13q), t(9q21q), i(17q), i(21q). Papildu marķieri, piemēram, der(5)t(5;7)(q31;p11) un 1p, tika konstatēti tikai nelielai subpopulācijai, kā arī mikrohromosomas un dubultās minūtes (DM). Dažās šūnās ir viena vai dažkārt divas Y hromosomas.

5637 šūnas ir tumorogēnas, un ir pierādīts, ka tās izraisa audzējus nude pelēm, kas inokulētas zemādas injekcijās. 5637 šūnu dubultošanās laiks ir aptuveni 24 stundas. 5637 šūnu izoenzīmu profilu veido AK-1, ES-D, Me-2 un PGM1 1. izoforma, GLO-I 1. un 2. izoforma, G6PD B izoforma, kā arī PGM3 2. izoforma. Attiecībā uz onkogēniem 5637 šūnas ir pozitīvas attiecībā uz FGFR3, PIK3CA, HRAS, KRAS, NRAS, TERT un CDKN2A, bet negatīvas attiecībā uz TP53 un pieder pie urīnpūšļa vēža apakštipa l5637 ir urīnpūšļa karcinomas šūnu līnija, kas izolēta no 68 gadus veca vīrieša urīnpūšļa ar II pakāpes karcinomu. 5637 šūnas ražo un izdala vairākus augšanas faktorus, piemēram, SCF, IL-1, IL-6, G-CSF un GM-CSF. Šie citokīni ir funkcionāli aktīvi un var būt vērtīgs avots, lai kultivētu pret augšanas faktoriem reaģējošas vai atkarīgas hematopoētiskās primārās šūnas un šūnu līnijas.

5637 šūnu kariotipa modālais hromosomu skaits ir 67, no 59 līdz 71. Cilmes līnijas modālais hromosomu skaits ir 67 - 36 % un poliploīdijas - 0,6 %. Šīm šūnām ir kopīgas četrpadsmit marķieru hromosomas, tostarp 3q+, 11q+, i(13q), t(9q21q), i(17q), i(21q). Papildu marķieri, piemēram, der(5)t(5;7)(q31;p11) un 1p, tika konstatēti tikai nelielai subpopulācijai, kā arī mikrohromosomas un dubultās minūtes (DM). Dažās šūnās ir viena vai dažkārt divas Y hromosomas.

5637 šūnas ir tumorigēnas, un ir pierādīts, ka tās izraisa audzējus nude pelēm, kas inokulētas zemādas injekcijās. 5637 šūnu dubultošanās laiks ir aptuveni 24 stundas. 5637 šūnu izoenzīmu profilu veido AK-1, ES-D, Me-2 un PGM1 1. izoforma, GLO-I 1. un 2. izoforma, G6PD B izoforma, kā arī PGM3 2. izoforma.

Attiecībā uz onkogēniem 5637 šūnas ir pozitīvas attiecībā uz FGFR3, PIK3CA, HRAS, KRAS, NRAS, TERT un CDKN2A, bet negatīvas attiecībā uz TP53 un pieder pie urīnpūšļa vēža luminālā apakštipa. Visbeidzot, 5637 šūnas ir vērtīgs instruments vēža pētījumiem, jo īpaši attiecībā uz augšanas faktoru, šūnu dalīšanās, onkogēnu un urīnpūšļa vēža izpēti.

Audums
Pūslis
Slimība
Karcinoma
Metastāžu vieta
Primārā audzēja lokalizācija (urīnpūslis)
Pieteikumi
Urīnpūšļa vēža pētījumi; hematopoētisko augšanas faktoru ražošana (SCF, IL-1, IL-6, G-CSF, GM-CSF); onkogēnu pētījumi (FGFR3, PIK3CA, HRAS, KRAS, TERT); jutība pret zālēm; transfekcijas saimniekšūnas; barotājšūnas hematopoētiskajām kultūrām

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
Bez ĢMO
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
No genetic modification; wildtype bladder carcinoma cell line
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija šūnas
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm.
Ploidijas statuss
Modālais hromosomu skaits cilmes līnijas šūnās ir 67, kas veido 36 % no kopējā hromosomu skaita. Poliploīdija sastopama 0,6 % šo šūnu. Katrai šūnai parasti bija viena vai dažkārt divas Y hromosomas.
Kariotips
Fenotipa biežuma produkts: 0.0056.
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
24 stundas

04Identifikatori

Atsauce
5637 (Cytion kataloga numurs 300105)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0126

05Pazīmes un uzņēmība

Izoenzīmi
Me-2, 1, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B
Produkti
IL-1, IL-6, G-CFS, GM-CSF, SCF

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Vispirms noņemiet veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgājiet tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisa šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugē 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 5
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2 3 dienu laikā izveidos konfluentu monoslāni.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
68 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis