Siirry sisältöön
ND7/23
Kudos
Aivot
Synonyymit
ND7-23

Asiakirjat

ND7/23

Cell line · Tuotenumero 305520

The ND7/23 cell line is an immortalized hybrid derived from the fusion of neonatal rat dorsal root ganglion (DRG) neurons with a mouse neuroblastoma (N18T...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

ND7/23-solulinja on ikuistettu hybridi, joka on peräisin vastasyntyneen rotan selkäjuurikeskusganglionin (DRG) hermosolujen ja hiiren neuroblastooman (N18TG2) fuusiosta. Tämä solulinja säilyttää lukuisia aistineuronien ominaisuuksia, ja sitä käytetään usein neurobiologisten prosessien, kuten nosiseption, hermoston uudistumisen ja hermosolujen ulokkeiden kasvun, tutkimiseen. ND7/23-solut ovat monipuolinen malli aistineuronien toiminnan solu- ja molekyylimekanismien ymmärtämiseen, erityisesti hermovaurioihin ja -korjautumiseen liittyvien reittien osalta. Ne ilmentävät useita aistineuroneihin ja nosiseptoreihin liittyviä reseptoreita, ionikanavia ja entsyymejä, minkä ansiosta ne soveltuvat monenlaisiin sovelluksiin neurotieteissä.

ND7/23-soluja käytetään laajalti aistineuronien erilaistumista koskevassa tutkimuksessa, jota usein indusoidaan tekijöillä kuten hermokasvutekijällä (NGF) tai dibutyryyli-cAMP:lla (db-cAMP). Eriytyneet solut kehittävät neuritteja, ilmentävät neurofilamenttiproteiineja ja osoittavat lisääntynyttä ilmentymistä nosiseptiiviseen signalointiin liittyvissä molekyyleissä, kuten transient receptor potential (TRP)-kanavissa, mukaan lukien TRPC4. Näiden ominaisuuksien ansiosta ND7/23-soluja voidaan käyttää mallina neurotrofisten tekijöiden vaikutusten tutkimiseen sekä potentiaalisten neuroterapeuttisten aineiden seulontaan. Solulinja mahdollistaa myös suurikapasiteettiset määritykset aistineuronien kalsiumdynamiikan, elektrofysiologisten ominaisuuksien ja lääkevasteiden analysoimiseksi.

Hermovaurioita koskevissa tutkimuksissa ND7/23-solut ovat tarjonneet tietoa TRPC-kanavien, erityisesti TRPC4:n, roolista aksonien uudistumisessa. TRPC4:ää kohdentavan lyhyen hiusneulamallisen RNA:n (shRNA) avulla tehdyt ilmentymisen vaimennuskokeet ovat osoittaneet neuritien kasvun hidastumista, mikä korostaa tämän kanavan merkitystä hermosolujen korjausmekanismeissa. Lisäksi ND7/23-solut tarjoavat helppokäyttöisen ja toistettavan järjestelmän signaalinsiirtoreittien sekä solujen reaktioiden tutkimiseen ulkoisiin ärsykkeisiin, mukaan lukien neurotoksiinit ja kipulääkkeet.

Kudos
Aivot
Synonyymit
  • ND7-23

02Luokittelu

Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Solutyyppi
Hiiren neuroblastoomasolut (N18 tg 2) × rotan selkäjuurikeskushermosolujen solut

04Tunnisteet

Lähdeviite
ND7/23 (Cytion-tuotenumero 305520)
NCBI-verotunnus
10090, 10116
Cellosaurus
CVCL_4259

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Kylvötiheys
1–3 × 10⁴ solua/cm²
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.