Pāriet uz saturu
ND7/23
Audums
Smadzenes
Sinonīmi
ND7-23

Dokumenti

ND7/23

Cell line · Preces numurs 305520

The ND7/23 cell line is an immortalized hybrid derived from the fusion of neonatal rat dorsal root ganglion (DRG) neurons with a mouse neuroblastoma (N18T...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

ND7/23 šūnu līnija ir nemirstīga hibrīda šūnu līnija, kas iegūta, sapludinot jaundzimuša žurkas mugurējās saknes ganglija (DRG) neironus ar peles neiroblastomu (N18TG2). Šī šūnu līnija saglabā daudzas sensorisko neironu īpašības un tiek bieži izmantota, lai pētītu neirobioloģiskos procesus, piemēram, nocicepciju, neiroreģenerāciju un neirītu izaugšanu. ND7/23 šūnas ir universāls modelis, kas ļauj izprast sensorālo neironu darbības šūnu un molekulāros mehānismus, jo īpaši ceļus, kas saistīti ar nervu bojājumiem un atjaunošanos. Tās ekspresē vairākus ar sensorajiem un nociceptoriem saistītus receptorus, jonu kanālus un fermentus, tādējādi padarot tās piemērotas dažādiem pielietojumiem neirozinātnēs.

ND7/23 šūnas plaši izmanto pētījumos, kas saistīti ar sensorisko neironu diferenciāciju, ko bieži inducē tādi faktori kā nervu augšanas faktors (NGF) vai dibutiril-cAMP (db-cAMP). Diferencētās šūnas attīsta neirītus, ekspresē neirofilamentu proteīnus un parāda pastiprinātu ar nociceptīvo signālu pārraidi saistītu molekulu ekspresiju, piemēram, pārejošo receptoru potenciāla (TRP) kanālus, tostarp TRPC4. Šīs īpašības ļauj ND7/23 šūnām kalpot par modeli neirotrofisko faktoru ietekmes izpētei un potenciālo neiroterapeitisko līdzekļu skrīningam. Šī šūnu līnija arī atvieglo augstas caurlaidspējas testus, lai analizētu kalcija dinamiku, elektrofizioloģiskās īpašības un reakcijas uz zālēm sensorajos neironos.

Pētījumos par nervu bojājumiem ND7/23 šūnas ir sniegušas ieskatu TRPC kanālu, jo īpaši TRPC4, lomā aksonu reģenerācijā. Knockdown eksperimenti, izmantojot īsu matu adatas veida RNS (shRNA), kas vērsta pret TRPC4, ir parādījuši samazinātu neirītu izaugšanu, uzsverot šī kanāla nozīmi neironu atjaunošanās mehānismos. Turklāt ND7/23 šūnas piedāvā viegli pieejamu un reproducējamu sistēmu signālu pārneses ceļu un šūnu reakciju uz ārējiem stimuliem, tostarp neirotoksīniem un pretsāpju līdzekļiem, izpētei.

Audums
Smadzenes
Sinonīmi
  • ND7-23

02Klasifikācija

Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Peles neiroblastomas šūnas (N18 tg 2) × žurku mugurējā saknes ganglija neironu šūnas

04Identifikatori

Atsauce
ND7/23 (Cytion kataloga numurs 305520)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090, 10116
Cellosaurus
CVCL_4259

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Sēšanas blīvums
1–3 × 10⁴ šūnas/cm²
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.