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M-MSV-Balb/3T3
Tissu
Embryonnaire
Synonymes
M-MSV-BALB/3T3

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M-MSV-Balb/3T3

Cell line · Référence du produit 400458

La lignée cellulaire M-MSV-Balb/3T3 est une lignée de fibroblastes de souris issue de souris BALB/c. Ces cellules sont largement utilisées dans la recherche en raison de leur croissance stable…

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01Informations générales

Description

La lignée cellulaire M-MSV-Balb/3T3 est une lignée cellulaire de fibroblastes de souris dérivée de souris BALB/c. Ces cellules sont largement utilisées dans la recherche en raison de leurs caractéristiques de croissance stables et de leur fond génétique bien caractérisé. Elles proviennent de la lignée cellulaire 3T3, qui est une lignée cellulaire de fibroblastes standard établie à partir de tissus embryonnaires de souris. Les cellules M-MSV-Balb/3T3 ont été transformées par le virus du sarcome murin de Moloney (M-MSV), ce qui en fait un outil précieux pour l'étude de l'oncogenèse virale, des voies de transduction du signal et des mécanismes moléculaires qui sous-tendent la transformation cellulaire et la tumorigenèse.

La transformation par le M-MSV confère à ces cellules une série de propriétés oncogènes, notamment des taux de prolifération accrus, la perte de l'inhibition de contact et la capacité de former des colonies dans la gélose molle, qui sont des caractéristiques de la transformation maligne. Ces caractéristiques rendent les cellules M-MSV-Balb/3T3 particulièrement utiles pour les études in vitro sur la biologie du cancer, y compris l'identification des oncogènes et des gènes suppresseurs de tumeurs, ainsi que pour le test de thérapies anticancéreuses potentielles. En outre, leur utilisation dans des expériences de transfection permet d'explorer la fonction et la régulation des gènes dans le contexte d'un phénotype transformé.

Tissu
Embryonnaire
Synonymes
  • M-MSV-BALB/3T3

02Classification

Organisme
Souris
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This murine fibroblast cell line (M-MSV-Balb/3T3) contains Moloney murine sarcoma virus (MOMSV) sequences introduced via transfection, without production of infectious virus, supporting transformed growth. The viral sequences are stably present in Balb/3T3-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type fibroblastique
Type de cellule
Fibroblaste
Tumorigène
Oui

04Identifiants

Référence
M-MSV-Balb/3T3 (numéro de catalogue Cytion 400458)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5793

05Expression et sensibilité

Expression des antigènes
H-2d
Virus
Virus Ectromelia (mousepox) : négatif.
Transcriptase inverse
Négatif

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
0,7 à 1 x 106 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
BALB/c
Âge du donneur
Embryon, 14 à 17 jours de gestation