Gå direkte til indholdet
M-MSV-Balb/3T3
Væv
Embryonal
Synonymer
M-MSV-BALB/3T3

Dokumenter

M-MSV-Balb/3T3

Cell line · Varenummer 400458

M-MSV-Balb/3T3-cellelinjen er en fibroblastcellelinje fra mus, der stammer fra BALB/c-mus. Disse celler anvendes i vid udstrækning i forskning på grund af deres stabile vækst ...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

M-MSV-Balb/3T3-cellelinjen er en musefibroblastcellelinje, der stammer fra BALB/c-mus. Disse celler bruges i vid udstrækning i forskning på grund af deres stabile vækstegenskaber og velkarakteriserede genetiske baggrund. De stammer fra 3T3-cellelinjen, som er en standard fibroblastcellelinje, der er etableret fra museembryonalt væv. M-MSV-Balb/3T3-cellerne er blevet transformeret af Moloney Murine Sarcoma Virus (M-MSV), hvilket gør dem til et værdifuldt værktøj til at studere viral onkogenese, signaltransduktionsveje og de molekylære mekanismer, der ligger til grund for cellulær transformation og tumorigenese.

Transformationen med M-MSV giver disse celler en række onkogene egenskaber, herunder øget proliferationsrate, tab af kontakthæmning og evnen til at danne kolonier i blød agar, som er kendetegnende for malign transformation. Disse egenskaber gør M-MSV-Balb/3T3-celler særligt nyttige til in vitro-studier af kræftbiologi, herunder identifikation af onkogener og tumorsuppressorgener samt testning af potentielle kræftbehandlinger. Derudover giver deres brug i transfektionseksperimenter mulighed for at udforske genfunktion og -regulering i forbindelse med en transformeret fænotype.

Væv
Embryonal
Synonymer
  • M-MSV-BALB/3T3

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This murine fibroblast cell line (M-MSV-Balb/3T3) contains Moloney murine sarcoma virus (MOMSV) sequences introduced via transfection, without production of infectious virus, supporting transformed growth. The viral sequences are stably present in Balb/3T3-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Fibroblast-lignende
Celletype
Fibroblast
Tumorfremkaldende
Yeees

04Identifikatorer

Kildehenvisning
M-MSV-Balb/3T3 (Cytion katalognummer 400458)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5793

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
H-2d
Vira
Ectromelia-virus (musekopper): negativ.
Revers transkriptase
Negativ

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
0,7 til 1 x 106 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
BALB/c
Donorens alder
Embryo, 14 til 17 dages drægtighed