Tartalomra ugrás
M-MSV-Balb/3T3
Szövet
Embrionális
Szinonimák
M-MSV-BALB/3T3

Dokumentumok

M-MSV-Balb/3T3

Cell line · Termékszám 400458

Az M-MSV-Balb/3T3 sejtvonal egy BALB/c egerekből származó egér fibroblaszt sejtvonal. Ezeket a sejteket stabil növekedésük miatt széles körben használják a kutatásban …

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás

Az M-MSV-Balb/3T3 sejtvonal egy BALB/c egerekből származó egér fibroblaszt sejtvonal. Ezeket a sejteket stabil növekedési jellemzőik és jól jellemzett genetikai hátterük miatt széles körben használják a kutatásban. A 3T3 sejtvonalból származnak, amely egy egér embrionális szövetből létrehozott standard fibroblaszt sejtvonal. Az M-MSV-Balb/3T3 sejteket a Moloney Murine Sarcoma Virus (M-MSV) transzformálta, ami értékes eszközzé teszi őket a vírusos onkogenezis, a jelátviteli útvonalak, valamint a sejtek átalakulásának és tumorigenezisének hátterében álló molekuláris mechanizmusok tanulmányozására.

Az M-MSV általi transzformáció számos onkogén tulajdonsággal ruházza fel ezeket a sejteket, beleértve a megnövekedett proliferációs rátát, a kontaktgátlás elvesztését és a lágy agarban való kolóniaképzés képességét, amelyek a rosszindulatú transzformáció jellemzői. Ezek a tulajdonságok teszik az M-MSV-Balb/3T3 sejteket különösen hasznossá a rákbiológia in vitro vizsgálataihoz, beleértve az onkogének és tumorszupresszor gének azonosítását, valamint a potenciális rákellenes terápiák tesztelését. Emellett transzfekciós kísérletekben való felhasználásuk lehetővé teszi a génfunkció és -szabályozás feltárását transzformált fenotípus kontextusában.

Szövet
Embrionális
Szinonimák
  • M-MSV-BALB/3T3

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This murine fibroblast cell line (M-MSV-Balb/3T3) contains Moloney murine sarcoma virus (MOMSV) sequences introduced via transfection, without production of infectious virus, supporting transformed growth. The viral sequences are stably present in Balb/3T3-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Fibroblaszt-szerű
Sejttípus
Fibroblasztok
Daganatképző
Igen

04Azonosítók

Hivatkozás
M-MSV-Balb/3T3 (Cytion katalógusszám: 400458)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_5793

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
H-2d
Vírusok
Ectromelia vírus (egérhimlő): negatív.
Fordított transzkriptáz
Negatív

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
0,7–1 x 106 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
BALB/c
Az adományozó életkora
Embrió, 14-17 napos vemhesség