Mine otse sisu juurde
M-MSV-Balb/3T3
Kude
Embrüonaalne
Sünonüümid
M-MSV-BALB/3T3

Dokumendid

M-MSV-Balb/3T3

Cell line · Toote number 400458

M-MSV-Balb/3T3 rakuliin on BALB/c hiirtelt saadud hiire fibroblastide rakuliin. Neid rakke kasutatakse teadustöös laialdaselt tänu nende stabiilsele kasvule ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

M-MSV-Balb/3T3 rakuliin on BALB/c-hiirtest saadud hiirte fibroblastide rakuliin. Neid rakke kasutatakse teadusuuringutes laialdaselt nende stabiilse kasvuomaduste ja hästi iseloomustatud geneetilise tausta tõttu. Need pärinevad 3T3 rakuliinist, mis on hiirte embrüokude põhjal loodud standardne fibroblastide rakuliin. M-MSV-Balb/3T3 rakud on transformeerunud Moloney Murine Sarcoma Virus (M-MSV) poolt, mis muudab need väärtuslikuks vahendiks viirusliku onkogeneesi, signaaliülekande radade ning rakkude muundumise ja kasvajate tekke aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks.

M-MSV transformeerumine annab nendele rakkudele mitmesuguseid onkogeenseid omadusi, sealhulgas suurenenud proliferatsioonikiiruse, kontakti inhibeerimise kadumise ja võime moodustada kolooniaid pehmel agaril, mis on pahaloomulise transformatsiooni tunnused. Need omadused muudavad M-MSV-Balb/3T3 rakud eriti kasulikuks vähibioloogia in vitro uuringutes, sealhulgas onkogeenide ja kasvajasupressorgeenide tuvastamiseks ning võimalike vähivastaste ravimeetodite testimiseks. Lisaks võimaldab nende kasutamine transfektsioonikatsetes uurida geenide funktsiooni ja regulatsiooni muundatud fenotüübi kontekstis.

Kude
Embrüonaalne
Sünonüümid
  • M-MSV-BALB/3T3

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This murine fibroblast cell line (M-MSV-Balb/3T3) contains Moloney murine sarcoma virus (MOMSV) sequences introduced via transfection, without production of infectious virus, supporting transformed growth. The viral sequences are stably present in Balb/3T3-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Rakutüüp
Fibroblastide
Tuumorigeenne
Jah

04Tunnused

Viide
M-MSV-Balb/3T3 (Cytioni katalooginumber 400458)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_5793

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
H-2d
Viirused
Ektromelia viirus (hiireviirus): negatiivne.
Pöördtranskriptaas
Negatiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
0,7 kuni 1 x 106 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
BALB/c
Doonori vanus
Embrüo, 14-17 päeva kestev tiinus