M-MSV-Balb/3T3
Cell line · Toote number 400458
M-MSV-Balb/3T3 rakuliin on BALB/c hiirtelt saadud hiire fibroblastide rakuliin. Neid rakke kasutatakse teadustöös laialdaselt tänu nende stabiilsele kasvule ...
Kohandamine / Soovitused
- M-MSV-Balb/3T3Cell line€430.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
M-MSV-Balb/3T3 rakuliin on BALB/c-hiirtest saadud hiirte fibroblastide rakuliin. Neid rakke kasutatakse teadusuuringutes laialdaselt nende stabiilse kasvuomaduste ja hästi iseloomustatud geneetilise tausta tõttu. Need pärinevad 3T3 rakuliinist, mis on hiirte embrüokude põhjal loodud standardne fibroblastide rakuliin. M-MSV-Balb/3T3 rakud on transformeerunud Moloney Murine Sarcoma Virus (M-MSV) poolt, mis muudab need väärtuslikuks vahendiks viirusliku onkogeneesi, signaaliülekande radade ning rakkude muundumise ja kasvajate tekke aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks.
M-MSV transformeerumine annab nendele rakkudele mitmesuguseid onkogeenseid omadusi, sealhulgas suurenenud proliferatsioonikiiruse, kontakti inhibeerimise kadumise ja võime moodustada kolooniaid pehmel agaril, mis on pahaloomulise transformatsiooni tunnused. Need omadused muudavad M-MSV-Balb/3T3 rakud eriti kasulikuks vähibioloogia in vitro uuringutes, sealhulgas onkogeenide ja kasvajasupressorgeenide tuvastamiseks ning võimalike vähivastaste ravimeetodite testimiseks. Lisaks võimaldab nende kasutamine transfektsioonikatsetes uurida geenide funktsiooni ja regulatsiooni muundatud fenotüübi kontekstis.
- Kude
- Embrüonaalne
- Sünonüümid
- M-MSV-BALB/3T3
02Klassifikatsioon
- Organism
- Hiir
- Sugu
- Naine
- Kasvuvõime
- Järgija
- GMO-staatus
- GMO-S1
- GMO-staatuse üksikasjad
- GMO-S1: This murine fibroblast cell line (M-MSV-Balb/3T3) contains Moloney murine sarcoma virus (MOMSV) sequences introduced via transfection, without production of infectious virus, supporting transformed growth. The viral sequences are stably present in Balb/3T3-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Fibroblastilaadsed
- Rakutüüp
- Fibroblastide
- Tuumorigeenne
- Jah
04Tunnused
- Viide
- M-MSV-Balb/3T3 (Cytioni katalooginumber 400458)
- NCBI maksukood
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5793
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Antigeeni ekspressioon
- H-2d
- Viirused
- Ektromelia viirus (hiireviirus): negatiivne.
- Pöördtranskriptaas
- Negatiivne
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS-ga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Külvitihedus
- 0,7 kuni 1 x 106 rakku/cm2
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Tõug / alamliik
- BALB/c
- Doonori vanus
- Embrüo, 14-17 päeva kestev tiinus
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Vastutuse välistamine
- Meie rakud on ette nähtud üksnes in vitro laboratoorseks uurimistööks ning need ei ole mõeldud kliiniliseks või diagnostiliseks kasutamiseks, samuti ei tohi neid manustada inimestele ega kasutada veterinaarsetel eesmärkidel. Kasutajad peavad järgima kõiki kohaldatavaid suuniseid ja eeskirju nende rakkude käitlemise ja kasutamise kohta teadusuuringutes.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah