Премини към съдържанието
M-MSV-Balb/3T3
Тъкан
Ембрионален
Синоними
M-MSV-BALB/3T3

Документи

M-MSV-Balb/3T3

Cell line · Номер на продукта 400458

Клетъчната линия M-MSV-Balb/3T3 е линия от миши фибробласти, получена от мишки от линията BALB/c. Тези клетки се използват широко в научните изследвания благодарение на стабилния си растеж...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия M-MSV-Balb/3T3 е миша фибробластна клетъчна линия, получена от мишки BALB/c. Тези клетки се използват широко в научните изследвания поради стабилните им характеристики на растеж и добре характеризирания генетичен фон. Те произхождат от клетъчна линия 3T3, която е стандартна фибробластна клетъчна линия, създадена от миши ембрионални тъкани. Клетките M-MSV-Balb/3T3 са трансформирани от вируса Moloney Murine Sarcoma Virus (M-MSV), което ги превръща в ценен инструмент за изследване на вирусната онкогенеза, пътищата на сигнална трансдукция и молекулярните механизми, лежащи в основата на клетъчната трансформация и туморогенезата.

Трансформацията от M-MSV придава на тези клетки редица онкогенни свойства, включително повишена степен на пролиферация, загуба на контактно инхибиране и способност за образуване на колонии в мек агар, които са отличителни белези на злокачествената трансформация. Тези характеристики правят M-MSV-Balb/3T3 клетките особено полезни за in vitro изследвания на биологията на рака, включително идентифициране на онкогени и тумор супресорни гени, както и за тестване на потенциални противоракови терапии. Освен това използването им в експерименти с трансфекция позволява изследване на генната функция и регулация в контекста на трансформиран фенотип.

Тъкан
Ембрионален
Синоними
  • M-MSV-BALB/3T3

02Класификация

Организъм
Мишка
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This murine fibroblast cell line (M-MSV-Balb/3T3) contains Moloney murine sarcoma virus (MOMSV) sequences introduced via transfection, without production of infectious virus, supporting transformed growth. The viral sequences are stably present in Balb/3T3-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на фибробласти
Тип клетка
Фибробласти
Туморогенен
Да

04Идентификатори

Източник
M-MSV-Balb/3T3 (каталожен номер 400458 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_5793

05Проява и предразположеност

Експресия на антигена
H-2d
Вируси
Вирус на ектромелия (миша едра шарка): отрицателен.
Обратна транскриптаза
Отрицателен

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
0,7 до 1 x 106 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Порода / подвид
BALB/c
Възраст на донора
Ембрион, 14 до 17 дни бременност