İçeriğe atla
M-MSV-Balb/3T3
Doku
Embriyonik
Eş anlamlılar
M-MSV-BALB/3T3

M-MSV-Balb/3T3

Cell line · Ürün numarası 400458

M-MSV-Balb/3T3 hücre hattı, BALB/c farelerinden elde edilen bir fare fibroblast hücre hattıdır. Bu hücreler, istikrarlı büyümeleri nedeniyle araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır ...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama

M-MSV-Balb/3T3 hücre hattı, BALB/c farelerinden türetilen bir fare fibroblast hücre hattıdır. Bu hücreler, istikrarlı büyüme özellikleri ve iyi karakterize edilmiş genetik arka planları nedeniyle araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Fare embriyonik dokusundan oluşturulan standart bir fibroblast hücre hattı olan 3T3 hücre hattından köken alırlar. M-MSV-Balb/3T3 hücreleri Moloney Murine Sarkoma Virüsü (M-MSV) tarafından dönüştürülmüştür, bu da onları viral onkogenez, sinyal iletim yolları ve hücresel dönüşüm ve tümörijenezin altında yatan moleküler mekanizmaları incelemek için değerli bir araç haline getirmektedir.

M-MSV tarafından gerçekleştirilen dönüşüm, bu hücrelere, malign dönüşümün ayırt edici özellikleri olan artan çoğalma oranları, temas inhibisyonunun kaybı ve yumuşak agarda koloniler oluşturma yeteneği dahil olmak üzere bir dizi onkojenik özellik kazandırır. Bu özellikler M-MSV-Balb/3T3 hücrelerini, onkogenlerin ve tümör baskılayıcı genlerin tanımlanmasının yanı sıra potansiyel antikanser tedavilerinin test edilmesi de dahil olmak üzere kanser biyolojisi üzerine in vitro çalışmalar için özellikle yararlı kılmaktadır. Ek olarak, transfeksiyon deneylerinde kullanılmaları, dönüştürülmüş bir fenotip bağlamında gen işlevinin ve düzenlemesinin araştırılmasına olanak tanır.

Doku
Embriyonik
Eş anlamlılar
  • M-MSV-BALB/3T3

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This murine fibroblast cell line (M-MSV-Balb/3T3) contains Moloney murine sarcoma virus (MOMSV) sequences introduced via transfection, without production of infectious virus, supporting transformed growth. The viral sequences are stably present in Balb/3T3-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast benzeri
Hücre türü
Fibroblast
Tümör oluşturucu
Evet

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
M-MSV-Balb/3T3 (Cytion katalog numarası 400458)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_5793

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
H-2d
Virüsler
Ektromelia virüsü (fare çiçeği): negatif.
Ters transkriptaz
Negatif

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
0,7 ila 1 x 106 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
BALB/c
Bağışçının yaşı
Embriyo, 14 ila 17 günlük gebelik