Pāriet uz saturu
M-MSV-Balb/3T3
Audums
Embrionālais
Sinonīmi
M-MSV-BALB/3T3

Dokumenti

M-MSV-Balb/3T3

Cell line · Preces numurs 400458

M-MSV-Balb/3T3 šūnu līnija ir no BALB/c pelēm iegūta peles fibroblastu šūnu līnija. Šīs šūnas tiek plaši izmantotas pētniecībā to stabilās augšanas dēļ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

M-MSV-Balb/3T3 šūnu līnija ir peļu fibroblastu šūnu līnija, kas iegūta no BALB/c pelēm. Šīs šūnas plaši izmanto pētniecībā, jo tām ir stabilas augšanas īpašības un labi raksturots ģenētiskais fons. Tās ir iegūtas no 3T3 šūnu līnijas, kas ir standarta fibroblastu šūnu līnija, kura izveidota no peļu embrionālajiem audiem. M-MSV-Balb/3T3 šūnas ir transformētas ar Moloney Murine Sarcoma Virus (M-MSV), padarot tās par vērtīgu instrumentu vīrusu onkoģenēzes, signālu pārraides ceļu un molekulāro mehānismu, kas ir šūnu transformācijas un audzēju veidošanās pamatā, pētīšanai.

M-MSV transformācija piešķir šīm šūnām virkni onkogēnu īpašību, tostarp palielinātu proliferācijas ātrumu, kontaktu inhibīcijas zudumu un spēju veidot kolonijas mīkstajā agārā, kas ir ļaundabīgas transformācijas pazīmes. Šīs īpašības padara M-MSV-Balb/3T3 šūnas īpaši noderīgas vēža bioloģijas in vitro pētījumiem, tostarp onkogēnu un audzēja supresoru gēnu identificēšanai, kā arī potenciālo pretvēža terapiju testēšanai. Turklāt to izmantošana transfekcijas eksperimentos ļauj izpētīt gēnu funkciju un regulāciju transformēta fenotipa kontekstā.

Audums
Embrionālais
Sinonīmi
  • M-MSV-BALB/3T3

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This murine fibroblast cell line (M-MSV-Balb/3T3) contains Moloney murine sarcoma virus (MOMSV) sequences introduced via transfection, without production of infectious virus, supporting transformed growth. The viral sequences are stably present in Balb/3T3-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Fibroblasti
Tumorogēns
Jā

04Identifikatori

Atsauce
M-MSV-Balb/3T3 (Cytion kataloga numurs 400458)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_5793

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
H-2d
Vīrusi
Ektromēlijas vīruss (peļu bakas): negatīvs.
Reversā transkriptāze
Negatīvs

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
0,7 līdz 1 x 106 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
BALB/c
Donora vecums
Embrijs, 14 līdz 17 grūtniecības dienas