الانتقال إلى المحتوى
M-MSV-Balb/3T3
الأنسجة
جنيني
المرادفات
M-MSV-BALB/3T3

المستندات

M-MSV-Balb/3T3

Cell line · رقم المنتج 400458

سلسلة الخلايا M-MSV-Balb/3T3 هي سلسلة خلايا ليفية من الفئران مشتقة من فئران BALB/c. وتُستخدم هذه الخلايا على نطاق واسع في الأبحاث بفضل نموها المستقر ...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف

خط الخلايا M-MSV-Balb/3T3 هو خط خلايا الخلايا الليفية للفأر المشتق من الفئران BALB/c. تُستخدم هذه الخلايا على نطاق واسع في الأبحاث نظراً لخصائص نموها المستقرة وخلفيتها الوراثية المميزة جيداً. تنشأ هذه الخلايا من خط الخلايا 3T3، وهو خط خلايا الخلايا الليفية القياسي الذي تم إنشاؤه من الأنسجة الجنينية للفأر. وقد تم تحويل خلايا M-MSV-Balb/3T3 بواسطة فيروس ساركوما مولوني موريني ساركوما (M-MSV)، مما يجعلها أداة قيّمة لدراسة التكوُّن الفيروسي للأورام ومسارات نقل الإشارات والآليات الجزيئية الكامنة وراء التحول الخلوي وتكوّن الأورام.

إن التحول بواسطة M-MSV يمنح هذه الخلايا مجموعة من الخصائص المسببة للأورام، بما في ذلك زيادة معدلات التكاثر، وفقدان تثبيط التلامس، والقدرة على تكوين مستعمرات في أجار لين، وهي السمات المميزة للتحول الخبيث. تجعل هذه السمات خلايا M-MSV-Balb/3T3 مفيدة بشكل خاص للدراسات المختبرية حول بيولوجيا السرطان، بما في ذلك تحديد الجينات المسببة للأورام والجينات المثبطة للأورام، بالإضافة إلى اختبار العلاجات المحتملة المضادة للسرطان. بالإضافة إلى ذلك، يسمح استخدامها في تجارب نقل الجينات باستكشاف وظيفة الجينات وتنظيمها في سياق النمط الظاهري المتحول.

الأنسجة
جنيني
المرادفات
  • M-MSV-BALB/3T3

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This murine fibroblast cell line (M-MSV-Balb/3T3) contains Moloney murine sarcoma virus (MOMSV) sequences introduced via transfection, without production of infectious virus, supporting transformed growth. The viral sequences are stably present in Balb/3T3-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
أرومة ليفية شبيهة بالأرومة الليفية
نوع الخلية
الأرومة الليفية
مُسبِّب للأورام
نعم

04المعرّفات

المرجع
M-MSV-Balb/3T3 (كتالوج سيتيون رقم 400458)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_5793

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
ح-2د
الفيروسات
فيروس إكتروميليا (جدري الفأر): سلبي.
إنزيم النسخ العكسي
سلبي

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
0.7 إلى 1 × 106 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
بالب/ج
عمر المتبرع
جنين، من 14 إلى 17 يوم حمل