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M-MSV-Balb/3T3
Tissue
Embryonnaire
Synonyms
M-MSV-BALB/3T3

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M-MSV-Balb/3T3

Cell line · Product number 400458

The M-MSV-Balb/3T3 cell line is a mouse fibroblast cell line derived from BALB/c mice. These cells are widely used in research due to their stable growth ...

US$395.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

La lignée cellulaire M-MSV-Balb/3T3 est une lignée de fibroblastes de souris dérivée de souris BALB/c. Ces cellules sont largement utilisées en recherche en raison de leurs caractéristiques de croissance stables et de leur profil génétique bien caractérisé. Elles proviennent de la lignée cellulaire 3T3, une lignée standard de fibroblastes établie à partir de tissu embryonnaire de souris. Les cellules M-MSV-Balb/3T3 ont été transformées par le virus du sarcome murin de Moloney (M-MSV), ce qui en fait un outil précieux pour l’étude de l’oncogenèse virale, des voies de transduction du signal et des mécanismes moléculaires sous-jacents à la transformation cellulaire et à la tumorigenèse.

La transformation par le M-MSV confère à ces cellules une série de propriétés oncogéniques, notamment des taux de prolifération accrus, la perte de l’inhibition par contact et la capacité de former des colonies dans de l’agar mou, qui sont des caractéristiques distinctives de la transformation maligne. Ces caractéristiques rendent les cellules M-MSV-Balb/3T3 particulièrement utiles pour les études in vitro sur la biologie du cancer, notamment l’identification des oncogènes et des gènes suppresseurs de tumeurs, ainsi que l’évaluation de traitements anticancéreux potentiels. De plus, leur utilisation dans des expériences de transfection permet d’étudier la fonction et la régulation des gènes dans le contexte d’un phénotype transformé.

Tissue
Embryonnaire
Synonyms
  • M-MSV-BALB/3T3

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine fibroblast cell line (M-MSV-Balb/3T3) contains Moloney murine sarcoma virus (MOMSV) sequences introduced via transfection, without production of infectious virus, supporting transformed growth. The viral sequences are stably present in Balb/3T3-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type fibroblaste
Cell type
Fibroblaste
Tumourigenic
Oui

04Identifiers

Citation
M-MSV-Balb/3T3 (numéro de catalogue Cytion 400458)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5793

05Expression and susceptibility

Antigen expression
H-2d
Viruses
Virus de l'ectromélie (variole de la souris) : négatif.
Reverse transcriptase
Négatif

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
de 0,7 à 1 × 10⁶ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
Embryon, entre le 14e et le 17e jour de gestation