Ga naar de inhoud
M-MSV-Balb/3T3
Weefsel
Embryonaal
Synoniemen
M-MSV-BALB/3T3

Documenten

M-MSV-Balb/3T3

Cell line · Productnummer 400458

De M-MSV-Balb/3T3-cellijn is een fibroblastcellijn van muizen, afkomstig van BALB/c-muizen. Deze cellen worden op grote schaal gebruikt in onderzoek vanwege hun stabiele groei ...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De M-MSV-Balb/3T3 cellijn is een fibroblastcellijn afkomstig van BALB/c muizen. Deze cellen worden veel gebruikt in onderzoek vanwege hun stabiele groeikenmerken en goed gekarakteriseerde genetische achtergrond. Ze zijn afkomstig van de 3T3-cellijn, een standaard fibroblastcellijn die is afgeleid van embryonaal weefsel van muizen. De M-MSV-Balb/3T3 cellen zijn getransformeerd door het Moloney Murine Sarcoma Virus (M-MSV), waardoor ze een waardevol instrument zijn voor het bestuderen van virale oncogenese, signaaltransductiepaden en de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan cellulaire transformatie en tumorigenese.

De transformatie door M-MSV verleent deze cellen een reeks oncogene eigenschappen, waaronder verhoogde proliferatiesnelheden, verlies van contactinhibitie en het vermogen om kolonies te vormen in zachte agar, wat kenmerkend is voor kwaadaardige transformatie. Deze eigenschappen maken M-MSV-Balb/3T3 cellen bijzonder nuttig voor in vitro studies naar kankerbiologie, inclusief de identificatie van oncogenen en tumorsuppressorgenen en het testen van potentiële antikankertherapieën. Daarnaast maakt het gebruik in transfectie-experimenten het mogelijk om de genfunctie en -regulatie te onderzoeken in de context van een getransformeerd fenotype.

Weefsel
Embryonaal
Synoniemen
  • M-MSV-BALB/3T3

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This murine fibroblast cell line (M-MSV-Balb/3T3) contains Moloney murine sarcoma virus (MOMSV) sequences introduced via transfection, without production of infectious virus, supporting transformed growth. The viral sequences are stably present in Balb/3T3-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast-achtige
Celtype
Fibroblast
Tumorverwekkend
Ja

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
M-MSV-Balb/3T3 (Cytion catalogusnummer 400458)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5793

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
H-2d
Virussen
Ectromeliavirus (muizenpokken): negatief.
Reverse transcriptase
Negatief

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
0,7 tot 1 x 106 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
BALB/c
Leeftijd van de donor
Embryo, 14 tot 17 dagen dracht