Siirry sisältöön
M-MSV-Balb/3T3
Kudos
Alkioaikainen
Synonyymit
M-MSV-BALB/3T3

Asiakirjat

M-MSV-Balb/3T3

Cell line · Tuotenumero 400458

M-MSV-Balb/3T3-solulinja on BALB/c-hiiristä peräisin oleva hiiren fibroblastisolulinja. Näitä soluja käytetään laajalti tutkimuksessa niiden vakaan kasvun ansiosta ...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

M-MSV-Balb/3T3-solulinja on hiiren fibroblastisolulinja, joka on peräisin BALB/c-hiiristä. Näitä soluja käytetään laajalti tutkimuksessa niiden vakaiden kasvuominaisuuksien ja hyvin karakterisoidun geneettisen taustan vuoksi. Ne ovat peräisin 3T3-solulinjasta, joka on hiiren alkiokudoksesta peräisin oleva vakio fibroblastisolulinja. M-MSV-Balb/3T3-solut on muunnettu Moloney Murine Sarcoma Virus (M-MSV) -viruksella, mikä tekee niistä arvokkaan välineen viruksen aiheuttaman onkogeneesin, signaalinsiirtoreittien sekä solujen muuntumisen ja kasvainten synnyn taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseen.

M-MSV:n aiheuttama transformaatio antaa näille soluille erilaisia onkogeenisiä ominaisuuksia, kuten lisääntynyt proliferaatiovauhti, kontaktin eston häviäminen ja kyky muodostaa pesäkkeitä pehmeässä agarissa, jotka ovat pahanlaatuisen transformaation tunnusmerkkejä. Nämä ominaisuudet tekevät M-MSV-Balb/3T3-soluista erityisen käyttökelpoisia syövän biologiaa koskevissa in vitro -tutkimuksissa, mukaan lukien onkogeenien ja kasvainsuppressorigeenien tunnistaminen sekä mahdollisten syöpähoitojen testaaminen. Lisäksi niiden käyttö transfektiokokeissa mahdollistaa geenien toiminnan ja säätelyn tutkimisen muuntuneen fenotyypin yhteydessä.

Kudos
Alkioaikainen
Synonyymit
  • M-MSV-BALB/3T3

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This murine fibroblast cell line (M-MSV-Balb/3T3) contains Moloney murine sarcoma virus (MOMSV) sequences introduced via transfection, without production of infectious virus, supporting transformed growth. The viral sequences are stably present in Balb/3T3-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset
Solutyyppi
Fibroblastit
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä

04Tunnisteet

Lähdeviite
M-MSV-Balb/3T3 (Cytionin luettelonumero 400458)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_5793

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
H-2d
Virukset
Ectromelia-virus (hiiren rokko): negatiivinen.
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
0,7–1 x 106 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
BALB/c
Luovuttajan ikä
Alkio, 14-17 vuorokauden ikäinen raskaus