Hep-56.1D

La lignée cellulaire d'hépatome Hep-56.1D est dérivée d'une tumeur hépatique de souris, plus précisément de la souche de souris C57BL/6J. Cette lignée cellulaire est caractérisée par une mutation notable du gène p53, identifiée à différents passages au cours de la propagation in vitro. Plus précisément, Hep-56.1D présente une transversion C:G à G:C au codon 132 de l'exon 5, entraînant un changement d'acide aminé de la cystéine au tryptophane. Cette mutation a été détectée au numéro de passage 17, ce qui suggère un avantage sélectif de croissance conféré par la mutation, conduisant à sa prédominance dans la population cellulaire.

La lignée cellulaire Hep-56.1D présente une morphologie principalement épithéliale, reflétant son origine hépatocytaire. Ceci est cohérent avec son profil de protéines de filaments intermédiaires, qui comprend les kératines simples K8 et K18, ainsi que la vimentine et la kératine K19 à des degrés divers. La présence de ces protéines confirme la nature hépatocytaire de la lignée cellulaire et sa classification comme lignée d'hépatome.

Une analyse plus poussée de Hep-56.1D à l'aide de l'empreinte ADN n'a pas révélé d'anomalies structurelles majeures, bien que certains changements dans l'intensité relative de bandes spécifiques aient été observés avec l'augmentation du nombre de passages. Cela indique une stabilité génomique avec un certain degré de variabilité sur des périodes de culture prolongées. L'analyse des mutations de p53 et les profils d'expression des protéines du filament intermédiaire font de Hep-56.1D un modèle précieux pour l'étude du carcinome hépatocellulaire et du rôle des mutations de p53 dans la tumorigenèse hépatique.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie