Hep-56.1D

Hepatomska celična linija Hep-56.1D je pridobljena iz tumorja jeter miši, natančneje iz seva C57BL/6J. Za to celično linijo je značilna opazna mutacija v genu p53, ugotovljena v različnih fazah med razmnoževanjem in vitro. Pri Hep-56.1D je na kodonu 132 eksona 5 prišlo do transverzije C:G v G:C, kar povzroči spremembo aminokislin iz cisteina v triptofan. Ta mutacija je bila odkrita pri prehodu št. 17, kar kaže na selektivno prednost pri rasti, ki jo daje mutacija, zaradi česar prevladuje v populaciji celic.

Celična linija Hep-56.1D ima pretežno epitelijsko morfologijo, kar kaže na njen hepatocitni izvor. To se ujema z njenim profilom proteinov vmesnih filamentov, ki vključuje preprosta keratina K8 in K18 ter v različnem obsegu tudi vimentin in keratin K19. Prisotnost teh beljakovin potrjuje hepatocitno naravo celične linije in njeno uvrstitev med hepatomske linije.

Nadaljnja analiza Hep-56.1D z uporabo prstnih odtisov DNK ni razkrila nobenih večjih strukturnih nepravilnosti, čeprav je bilo opaziti nekatere spremembe v relativni intenzivnosti določenih pasov z naraščanjem števila prehodov. To kaže na genomsko stabilnost z določeno stopnjo variabilnosti v daljših obdobjih gojenja. Analiza mutacij p53 in vzorci izražanja proteinov vmesnih filamentov skupaj vzpostavljajo Hep-56.1D kot dragocen model za preučevanje hepatocelularnega karcinoma in vloge mutacij p53 pri tumorigenezi jeter.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo